时珍国医国药
時珍國醫國藥
시진국의국약
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH
2012年
4期
787-790
,共4页
董燕%刁玲武%周联%易浪%朱丹丹
董燕%刁玲武%週聯%易浪%硃丹丹
동연%조령무%주련%역랑%주단단
阳春砂愈伤组织%农杆菌%转化%抗菌肽%影响因素
暘春砂愈傷組織%農桿菌%轉化%抗菌肽%影響因素
양춘사유상조직%농간균%전화%항균태%영향인소
目的 确定遗传转化条件,将抗菌肽CN基因转入阳春砂愈伤组织.方法 以阳春砂愈伤组织为受体材料,以农杆菌EHA105/pCAMBlA1305.2 - CN工程细胞介导抗菌肽CN基因转化阳春砂,设计正交实验,通过分析gus报告基因的瞬时表达比较转化影响因素,并对目的基因CN进行PCR检测.结果 农杆菌浓度、侵染时间、共培养温度、共培养时间及乙酰丁香酮浓度对转化率的影响有显著差异性.阳春砂愈伤组织遗传转化的最佳条件组合是:农杆菌浓度为OD600=0.5,侵染时间10 min,共培养温度24℃,共培养时间4d,共培养培养基添加乙酰丁香酮200 μmol·L-.gus基因瞬时表达呈阳性的愈伤组织DNA经目的基因CN的PCR检测可见清晰的目的条带.结论 建立了农杆菌介导的阳春砂愈伤组织的转化条件,目的基因CN已转入阳春砂愈伤组织.
目的 確定遺傳轉化條件,將抗菌肽CN基因轉入暘春砂愈傷組織.方法 以暘春砂愈傷組織為受體材料,以農桿菌EHA105/pCAMBlA1305.2 - CN工程細胞介導抗菌肽CN基因轉化暘春砂,設計正交實驗,通過分析gus報告基因的瞬時錶達比較轉化影響因素,併對目的基因CN進行PCR檢測.結果 農桿菌濃度、侵染時間、共培養溫度、共培養時間及乙酰丁香酮濃度對轉化率的影響有顯著差異性.暘春砂愈傷組織遺傳轉化的最佳條件組閤是:農桿菌濃度為OD600=0.5,侵染時間10 min,共培養溫度24℃,共培養時間4d,共培養培養基添加乙酰丁香酮200 μmol·L-.gus基因瞬時錶達呈暘性的愈傷組織DNA經目的基因CN的PCR檢測可見清晰的目的條帶.結論 建立瞭農桿菌介導的暘春砂愈傷組織的轉化條件,目的基因CN已轉入暘春砂愈傷組織.
목적 학정유전전화조건,장항균태CN기인전입양춘사유상조직.방법 이양춘사유상조직위수체재료,이농간균EHA105/pCAMBlA1305.2 - CN공정세포개도항균태CN기인전화양춘사,설계정교실험,통과분석gus보고기인적순시표체비교전화영향인소,병대목적기인CN진행PCR검측.결과 농간균농도、침염시간、공배양온도、공배양시간급을선정향동농도대전화솔적영향유현저차이성.양춘사유상조직유전전화적최가조건조합시:농간균농도위OD600=0.5,침염시간10 min,공배양온도24℃,공배양시간4d,공배양배양기첨가을선정향동200 μmol·L-.gus기인순시표체정양성적유상조직DNA경목적기인CN적PCR검측가견청석적목적조대.결론 건립료농간균개도적양춘사유상조직적전화조건,목적기인CN이전입양춘사유상조직.
