CAJ | 학술논문

目的:观察骨髓间充质干细胞移植治疗迪谢内肌营养不良模型鼠后肌肉病理改变,及迪谢内肌营养不良致病基因dystrophin蛋白表达变化.方法:实验于2003-07/2004-07在华中科技大学同济医学院同济医院神经科实验室进行.取4～6周龄C57BL/6雄性小鼠的股骨和胫骨,采用密度梯度分离和贴壁培养相结合的方法分离培养骨髓间充质干细胞.①正常组:2周龄C57BL/6小鼠4只,不干预.②对照组:2周龄mdx鼠4只,左后腿腓肠肌注射50μL磷酸盐缓冲液.③移植组:2周龄mdx鼠4只,左后腿腓肠肌注射50 μL骨髓间充质干细胞细胞悬液(约1×106).16周后3组小鼠麻醉下取左腿腓肠肌中部肌肉,苏木精-伊红染色后观察核内移肌纤维占总肌纤维百分率,及dystrophin免疫组化染色计算阳性纤维与总肌纤维百分率.结果:12只小鼠均进入结果分析.①核内移肌纤维占总肌纤维百分率:正常组肌纤维少核内移(1.2%);对照组肌纤维大小不等,大量核内移(75%);移植组肌纤维核内移明显减少(23.3%).②dystrophin染色阳性纤维与总肌纤维百分率:正常组为100%,移植组显著高于对照组(75%,23.3%).结论:骨髓间充质干细胞移植治疗迪谢内肌营养不良模型小鼠mdx,可使其骨骼肌细胞膜骨架蛋白dystrophin恢复,肌肉病理改变好转,且疗效持续到治疗后4个月以上,提示骨髓间充质干细胞移植对mdx小鼠治疗有效.
목적:관찰골수간충질간세포이식치료적사내기영양불량모형서후기육병리개변,급적사내기영양불량치병기인dystrophin단백표체변화.방법:실험우2003-07/2004-07재화중과기대학동제의학원동제의원신경과실험실진행.취4～6주령C57BL/6웅성소서적고골화경골,채용밀도제도분리화첩벽배양상결합적방법분리배양골수간충질간세포.①정상조:2주령C57BL/6소서4지,불간예.②대조조:2주령mdx서4지,좌후퇴비장기주사50μL린산염완충액.③이식조:2주령mdx서4지,좌후퇴비장기주사50 μL골수간충질간세포세포현액(약1×106).16주후3조소서마취하취좌퇴비장기중부기육,소목정-이홍염색후관찰핵내이기섬유점총기섬유백분솔,급dystrophin면역조화염색계산양성섬유여총기섬유백분솔.결과:12지소서균진입결과분석.①핵내이기섬유점총기섬유백분솔:정상조기섬유소핵내이(1.2%);대조조기섬유대소불등,대량핵내이(75%);이식조기섬유핵내이명현감소(23.3%).②dystrophin염색양성섬유여총기섬유백분솔:정상조위100%,이식조현저고우대조조(75%,23.3%).결론:골수간충질간세포이식치료적사내기영양불량모형소서mdx,가사기골격기세포막골가단백dystrophin회복,기육병리개변호전,차료효지속도치료후4개월이상,제시골수간충질간세포이식대mdx소서치료유효.