中国旱獭IL-10分子的克隆和序列分析
중국한달IL-10분자적극륭화서렬분석
Cloning and Sequence Analysis of Chinese Marmot Interleukin-10
  • 万方数据
    医学分子生物学杂志 의학분자생물학잡지
    FOREIGN MEDICAL SCIENCES
    2006年 5期 344-346 ,共3页

    李安意%王宝菊%田拥军%江敏%鲍俊杰%郝友华%喻植群%陆蒙吉%杨东亮

    리안의%왕보국%전옹군%강민%포준걸%학우화%유식군%륙몽길%양동량

    中国旱獭%白细胞介素-10%序列分析 中國旱獺%白細胞介素-10%序列分析
    중국한달%백세포개소-10%서렬분석
    目的 克隆旱獭白细胞介素-10(IL-10)全长cDNA序列进行序列分析,为IL-10分子的表达和在土拨鼠肝炎病毒(woodchuck hepatitis virus,WHV)感染中的应用奠定基础.方法 根据Genbank的土拨鼠IL-10 cDNA序列,在5′非编码区和3′非编码区设计特异性引物,提取旱獭脾组织总RNA作为模板,RT-PCR扩增旱獭IL-10 cDNA.PCR产物纯化后连接至T载体(pMD18-T),构建重组质粒pMD18-T-cmIL-10.对重组质粒进行酶切鉴定,选择阳性克隆测序.对所获得的序列应用分析软件进行分析.结果 RT-PCR扩增产物为685 bp.重组质粒pMD18-T-cmIL-10经EcoR Ⅰ与Pst Ⅰ双酶切提示含目的基因片段.序列分析提示旱獭IL-10的编码序列为537 bp,与土拨鼠IL-10的同源性为100%.结论 成功克隆旱獭IL-10分子,并构建重组质粒pMD18-T-cmIL-10.
    목적 극륭한달백세포개소-10(IL-10)전장cDNA서렬진행서렬분석,위IL-10분자적표체화재토발서간염병독(woodchuck hepatitis virus,WHV)감염중적응용전정기출.방법 근거Genbank적토발서IL-10 cDNA서렬,재5′비편마구화3′비편마구설계특이성인물,제취한달비조직총RNA작위모판,RT-PCR확증한달IL-10 cDNA.PCR산물순화후련접지T재체(pMD18-T),구건중조질립pMD18-T-cmIL-10.대중조질립진행매절감정,선택양성극륭측서.대소획득적서렬응용분석연건진행분석.결과 RT-PCR확증산물위685 bp.중조질립pMD18-T-cmIL-10경EcoR Ⅰ여Pst Ⅰ쌍매절제시함목적기인편단.서렬분석제시한달IL-10적편마서렬위537 bp,여토발서IL-10적동원성위100%.결론 성공극륭한달IL-10분자,병구건중조질립pMD18-T-cmIL-10.
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