东南国防医药
東南國防醫藥
동남국방의약
JOURNAL OF SOUTHEAST CHINA NATIONAL DEFENCE MEDICAL SCIENCE
2007年
3期
165-168
,共4页
张曙云%金勇丰%钱凯先%张耀洲
張曙雲%金勇豐%錢凱先%張耀洲
장서운%금용봉%전개선%장요주
家蚕杆状病毒表达载体系统%肿瘤坏死因子相关诱导配体%凋亡
傢蠶桿狀病毒錶達載體繫統%腫瘤壞死因子相關誘導配體%凋亡
가잠간상병독표체재체계통%종류배사인자상관유도배체%조망
目的 以家蚕为生物反应器表达人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL),并检测其生物学活性.方法 将人TRAIL(93～281aa)基因重组于质粒pBacPAK8构建重组转移载体pBacAK8-TRAIL.与经线性化修饰的家蚕棱型多角体病毒(BmBacPAK)DNA共转染家蚕培养细胞株BmN,获得了插入TRAIL基因的重组病毒,重组病毒感染家蚕细胞和家蚕幼虫,使其表达人TRAIL.结果 Southern杂交表明重组病毒基因组中含有人TRAIL基因片段,RNA斑点杂交表明人TRAIL基因得到了转录,重组病毒感染家蚕细胞株(BmN)、家蚕幼虫,在细胞培养上清、细胞抽提物、幼虫的体液样品中通过Westblot分析都能检测得到表达产物的特异性条带;采用L929细胞检测TRAIL的生物学活性.结论 提示人TRAIL基因分别在家蚕培养细胞和蚕幼虫中得到高效表达,此基因杆状病毒表达系统的建立为进一步研究TRAIL奠定了基础.
目的 以傢蠶為生物反應器錶達人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL),併檢測其生物學活性.方法 將人TRAIL(93～281aa)基因重組于質粒pBacPAK8構建重組轉移載體pBacAK8-TRAIL.與經線性化脩飾的傢蠶稜型多角體病毒(BmBacPAK)DNA共轉染傢蠶培養細胞株BmN,穫得瞭插入TRAIL基因的重組病毒,重組病毒感染傢蠶細胞和傢蠶幼蟲,使其錶達人TRAIL.結果 Southern雜交錶明重組病毒基因組中含有人TRAIL基因片段,RNA斑點雜交錶明人TRAIL基因得到瞭轉錄,重組病毒感染傢蠶細胞株(BmN)、傢蠶幼蟲,在細胞培養上清、細胞抽提物、幼蟲的體液樣品中通過Westblot分析都能檢測得到錶達產物的特異性條帶;採用L929細胞檢測TRAIL的生物學活性.結論 提示人TRAIL基因分彆在傢蠶培養細胞和蠶幼蟲中得到高效錶達,此基因桿狀病毒錶達繫統的建立為進一步研究TRAIL奠定瞭基礎.
목적 이가잠위생물반응기표체인종류배사인자상관조망유도배체(TRAIL),병검측기생물학활성.방법 장인TRAIL(93～281aa)기인중조우질립pBacPAK8구건중조전이재체pBacAK8-TRAIL.여경선성화수식적가잠릉형다각체병독(BmBacPAK)DNA공전염가잠배양세포주BmN,획득료삽입TRAIL기인적중조병독,중조병독감염가잠세포화가잠유충,사기표체인TRAIL.결과 Southern잡교표명중조병독기인조중함유인TRAIL기인편단,RNA반점잡교표명인TRAIL기인득도료전록,중조병독감염가잠세포주(BmN)、가잠유충,재세포배양상청、세포추제물、유충적체액양품중통과Westblot분석도능검측득도표체산물적특이성조대;채용L929세포검측TRAIL적생물학활성.결론 제시인TRAIL기인분별재가잠배양세포화잠유충중득도고효표체,차기인간상병독표체계통적건립위진일보연구TRAIL전정료기출.
