第三军医大学学报
第三軍醫大學學報
제삼군의대학학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
2007年
13期
1273-1275
,共3页
娄桂予%陈敏%陈彬%陈健%李渝萍%周度金
婁桂予%陳敏%陳彬%陳健%李渝萍%週度金
루계여%진민%진빈%진건%리투평%주도금
HNF1α基因%真核细胞%表达载体%转染
HNF1α基因%真覈細胞%錶達載體%轉染
HNF1α기인%진핵세포%표체재체%전염
目的 构建人肝细胞核因子-1α(hepatocyte nuclear factor 1α,HNF1α)真核表达载体,在体外表达并检测.方法 提取HepG2总RNA,用RT-PCR方法制备HNF1α cDNA,进行T-A 克隆.Hind Ⅲ/EcoR Ⅰ双酶切测序正确的重组质粒,回收HNF1α cDNA片段,将其亚克隆于pcDNA3.1(+)载体的多克隆位点内.将构建好的真核表达质粒用脂质体法转染HepG2细胞,RT-PCR和免疫印迹法检测HNF1α的表达. 结果正确构建了pcDNA3.1(+)-HNF1α重组载体,并且在转染该质粒的HepG2细胞中检测出了HNF1α的高表达. 结论成功地构建了人HNF1α真核表达载体,其可以在体外表达.
目的 構建人肝細胞覈因子-1α(hepatocyte nuclear factor 1α,HNF1α)真覈錶達載體,在體外錶達併檢測.方法 提取HepG2總RNA,用RT-PCR方法製備HNF1α cDNA,進行T-A 剋隆.Hind Ⅲ/EcoR Ⅰ雙酶切測序正確的重組質粒,迴收HNF1α cDNA片段,將其亞剋隆于pcDNA3.1(+)載體的多剋隆位點內.將構建好的真覈錶達質粒用脂質體法轉染HepG2細胞,RT-PCR和免疫印跡法檢測HNF1α的錶達. 結果正確構建瞭pcDNA3.1(+)-HNF1α重組載體,併且在轉染該質粒的HepG2細胞中檢測齣瞭HNF1α的高錶達. 結論成功地構建瞭人HNF1α真覈錶達載體,其可以在體外錶達.
목적 구건인간세포핵인자-1α(hepatocyte nuclear factor 1α,HNF1α)진핵표체재체,재체외표체병검측.방법 제취HepG2총RNA,용RT-PCR방법제비HNF1α cDNA,진행T-A 극륭.Hind Ⅲ/EcoR Ⅰ쌍매절측서정학적중조질립,회수HNF1α cDNA편단,장기아극륭우pcDNA3.1(+)재체적다극륭위점내.장구건호적진핵표체질립용지질체법전염HepG2세포,RT-PCR화면역인적법검측HNF1α적표체. 결과정학구건료pcDNA3.1(+)-HNF1α중조재체,병차재전염해질립적HepG2세포중검측출료HNF1α적고표체. 결론성공지구건료인HNF1α진핵표체재체,기가이재체외표체.
