CAJ | 학술논문

目的:比较2种萤火虫荧光素酶活性检测方法的一致性.方法:分别采用化学发光技术(Che)及活体光学成像技术(Bio),从细胞和动物水平检测在转染以萤火虫荧光素酶为报告基因的载体pCI-AAA-Fluc-neo后不同时间点,萤火虫荧光素酶的表达强度.结果:在细胞和动物水平,萤火虫荧光素酶的表达强度均随时间推移逐步递减.在HepG2细胞,萤火虫荧光素酶表达持续96 h,活性从24 h的2781±220 mV(1.6×106±2.3×105光子)降至96 h的49±3.5 mV(6.4×104±2.5×104光子).在动物水平得到相似的结果,BALB/c小鼠萤火虫荧光素酶表达持续20 d,其活性从1 d的16592±409 mV(1.9×108±3.6×106光子)降至20 d的798±139 mV(3.37×105±3.8×104光子).通过一致性检验,2种检测方法在细胞和动物水平的直线回归方程分别为lgChe=1.186·lgBio-3.764(r=0.937,P＜0.001)和lgChe=0.451·lgBio+0.64(r=0.915,P＜0.001);进一步将理论数据与实验数据进行配对t检验,二者无统计学差异(P＞0.05).结论:2种检测方法是一致的;从整个实验过程来看,活体光学成像技术较化学发光法更为简便、直观,可量化地对同一个体连续检测,减少了个体间差异和实验动物用量.
목적:비교2충형화충형광소매활성검측방법적일치성.방법:분별채용화학발광기술(Che)급활체광학성상기술(Bio),종세포화동물수평검측재전염이형화충형광소매위보고기인적재체pCI-AAA-Fluc-neo후불동시간점,형화충형광소매적표체강도.결과:재세포화동물수평,형화충형광소매적표체강도균수시간추이축보체감.재HepG2세포,형화충형광소매표체지속96 h,활성종24 h적2781±220 mV(1.6×106±2.3×105광자)강지96 h적49±3.5 mV(6.4×104±2.5×104광자).재동물수평득도상사적결과,BALB/c소서형화충형광소매표체지속20 d,기활성종1 d적16592±409 mV(1.9×108±3.6×106광자)강지20 d적798±139 mV(3.37×105±3.8×104광자).통과일치성검험,2충검측방법재세포화동물수평적직선회귀방정분별위lgChe=1.186·lgBio-3.764(r=0.937,P＜0.001)화lgChe=0.451·lgBio+0.64(r=0.915,P＜0.001);진일보장이론수거여실험수거진행배대t검험,이자무통계학차이(P＞0.05).결론:2충검측방법시일치적;종정개실험과정래간,활체광학성상기술교화학발광법경위간편、직관,가양화지대동일개체련속검측,감소료개체간차이화실험동물용량.