微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2008年
4期
446-451
,共6页
刘琼光%张静一%王玉涛%王振中
劉瓊光%張靜一%王玉濤%王振中
류경광%장정일%왕옥도%왕진중
水稻基腐细菌%毒素%质粒%分子标记
水稻基腐細菌%毒素%質粒%分子標記
수도기부세균%독소%질립%분자표기
[目的]水稻基腐病(Erwinia chrysanthemi pv.zeae)是水稻上重要的细菌病害之一,本论文对该病菌的毒素遗传特性和产毒相关的分子标记进行了研究.[方法]通过化学诱变方法,筛选基腐细菌去质粒的突变体Ech7-mu1;应用RAPD技术,筛选产毒素相关的分子标记.[结果]毒素活性测定结果表明,野生菌Ech7和去质粒菌株Ech7-mu1都能产生毒素.从260条随机引物中,筛选出引物K10,该引物能从不产生毒素的突变株Ech7-4中扩增出大小为2139bp的DNA特异片段,但不能扩增野生菌Ech7,将该片段克隆,测序分析,设计特异引物,在突变体Ech7-4中获得了与毒素产生相关的SCAR分子标记(标记符合率为100%).该基因片段有5个ORFs,其中2个ORFs分别编码NADH-黄素还原酶和N-乙酰转移酶,另外2个不完整的ORFs编码的蛋白分别与Pseudomonas aerginosa(ZP00136947)和Yersinia Pestis(ZP01177873)的抗菌素代谢转运蛋白通透酶(DMT)具有66%和46%的同源率.[结论]水稻基腐细菌毒素的生物合成是由染色体基因编码,与质粒无关.不产生毒素的突变菌株基因突变的位点位于SCAR标记DNA的3'末端.
[目的]水稻基腐病(Erwinia chrysanthemi pv.zeae)是水稻上重要的細菌病害之一,本論文對該病菌的毒素遺傳特性和產毒相關的分子標記進行瞭研究.[方法]通過化學誘變方法,篩選基腐細菌去質粒的突變體Ech7-mu1;應用RAPD技術,篩選產毒素相關的分子標記.[結果]毒素活性測定結果錶明,野生菌Ech7和去質粒菌株Ech7-mu1都能產生毒素.從260條隨機引物中,篩選齣引物K10,該引物能從不產生毒素的突變株Ech7-4中擴增齣大小為2139bp的DNA特異片段,但不能擴增野生菌Ech7,將該片段剋隆,測序分析,設計特異引物,在突變體Ech7-4中穫得瞭與毒素產生相關的SCAR分子標記(標記符閤率為100%).該基因片段有5箇ORFs,其中2箇ORFs分彆編碼NADH-黃素還原酶和N-乙酰轉移酶,另外2箇不完整的ORFs編碼的蛋白分彆與Pseudomonas aerginosa(ZP00136947)和Yersinia Pestis(ZP01177873)的抗菌素代謝轉運蛋白通透酶(DMT)具有66%和46%的同源率.[結論]水稻基腐細菌毒素的生物閤成是由染色體基因編碼,與質粒無關.不產生毒素的突變菌株基因突變的位點位于SCAR標記DNA的3'末耑.
[목적]수도기부병(Erwinia chrysanthemi pv.zeae)시수도상중요적세균병해지일,본논문대해병균적독소유전특성화산독상관적분자표기진행료연구.[방법]통과화학유변방법,사선기부세균거질립적돌변체Ech7-mu1;응용RAPD기술,사선산독소상관적분자표기.[결과]독소활성측정결과표명,야생균Ech7화거질립균주Ech7-mu1도능산생독소.종260조수궤인물중,사선출인물K10,해인물능종불산생독소적돌변주Ech7-4중확증출대소위2139bp적DNA특이편단,단불능확증야생균Ech7,장해편단극륭,측서분석,설계특이인물,재돌변체Ech7-4중획득료여독소산생상관적SCAR분자표기(표기부합솔위100%).해기인편단유5개ORFs,기중2개ORFs분별편마NADH-황소환원매화N-을선전이매,령외2개불완정적ORFs편마적단백분별여Pseudomonas aerginosa(ZP00136947)화Yersinia Pestis(ZP01177873)적항균소대사전운단백통투매(DMT)구유66%화46%적동원솔.[결론]수도기부세균독소적생물합성시유염색체기인편마,여질립무관.불산생독소적돌변균주기인돌변적위점위우SCAR표기DNA적3'말단.