生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2008年
2期
18-20
,共3页
冉旭华%孟凡%闻晓波%单玉波%周恩民
冉旭華%孟凡%聞曉波%單玉波%週恩民
염욱화%맹범%문효파%단옥파%주은민
猪细小病毒%NS1蛋白%主要抗原表位区%表达
豬細小病毒%NS1蛋白%主要抗原錶位區%錶達
저세소병독%NS1단백%주요항원표위구%표체
目的:用大肠杆菌表达猪细小病毒NS1基因的主要抗原表位区.方法:通过对GenBank发表的猪细小病毒(Porcine Parvovirus,PPV)中国株非结构蛋白NS1的氨基酸序列分析,确定了其中抗原性较高的区域,针对此区域设计并合成了一对特异性引物,扩增出包含NS1主要抗原表位区的843bp的片段.酶切后连接到原核表达载体pET30a(+)上,构建的原核表达载体pE130a -NSls转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,诱导表达.结果:重组蛋白大小约为43kD,与预期大小相符.Western blot分析表明,该蛋白能与标准阳性血清发生特异性反应,证明该蛋白具有生物学活性.结论:NS1蛋白主要抗原表位区在大肠杆菌中成功表达,具有免疫原性.可作为鉴别诊断抗原用于WV的临床检测.
目的:用大腸桿菌錶達豬細小病毒NS1基因的主要抗原錶位區.方法:通過對GenBank髮錶的豬細小病毒(Porcine Parvovirus,PPV)中國株非結構蛋白NS1的氨基痠序列分析,確定瞭其中抗原性較高的區域,針對此區域設計併閤成瞭一對特異性引物,擴增齣包含NS1主要抗原錶位區的843bp的片段.酶切後連接到原覈錶達載體pET30a(+)上,構建的原覈錶達載體pE130a -NSls轉化大腸桿菌BL21(DE3)感受態細胞,誘導錶達.結果:重組蛋白大小約為43kD,與預期大小相符.Western blot分析錶明,該蛋白能與標準暘性血清髮生特異性反應,證明該蛋白具有生物學活性.結論:NS1蛋白主要抗原錶位區在大腸桿菌中成功錶達,具有免疫原性.可作為鑒彆診斷抗原用于WV的臨床檢測.
목적:용대장간균표체저세소병독NS1기인적주요항원표위구.방법:통과대GenBank발표적저세소병독(Porcine Parvovirus,PPV)중국주비결구단백NS1적안기산서렬분석,학정료기중항원성교고적구역,침대차구역설계병합성료일대특이성인물,확증출포함NS1주요항원표위구적843bp적편단.매절후련접도원핵표체재체pET30a(+)상,구건적원핵표체재체pE130a -NSls전화대장간균BL21(DE3)감수태세포,유도표체.결과:중조단백대소약위43kD,여예기대소상부.Western blot분석표명,해단백능여표준양성혈청발생특이성반응,증명해단백구유생물학활성.결론:NS1단백주요항원표위구재대장간균중성공표체,구유면역원성.가작위감별진단항원용우WV적림상검측.
