水产学报
水產學報
수산학보
JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA
2008年
4期
526-532
,共7页
SHI Zhi-yi%杨显祥%CHEN Xiao-wu%李勇
SHI Zhi-yi%楊顯祥%CHEN Xiao-wu%李勇
SHI Zhi-yi%양현상%CHEN Xiao-wu%리용
三角帆蚌%alpha-2巨球蛋白%基因表达
三角帆蚌%alpha-2巨毬蛋白%基因錶達
삼각범방%alpha-2거구단백%기인표체
alpha-2巨球蛋白是河蚌体内重要的天然免疫因子,参与广泛的免疫防御和调节.通过RACE法克隆了三角帆蚌α2M全长cDNA序列,提交Genbank,获得核苷酸序列登陆号:DQ 993157.1.同时,采用生物信息学方法对alpha-2巨球蛋白进行了系统分析.该基因cDNA全长5 124 bp,其中编码区4 836 bp,5'端非编码区35 bp,3'端非编码区为253 bp(含polyA尾31 bp),该基因能编码1 611个氨基酸,其中前23个氨基酸残基为信号肽序列,成熟蛋白分子量为177 571.8 u,等电点为5.49.蛋白的不稳定系数为39.53,表明该蛋白是稳定的.在此基础上,以18 S作为内标,利用半定量RT-PCR法检测α2M基因在三角帆蚌不同组织和不同生理状态下的表达情况.结果表明,alpha-2巨球蛋白仅在血细胞中有表达,而在外套膜、闭壳肌、肠和性腺中没有表达.经注射大肠杆菌和嗜水气单胞菌12 h后,三角帆蚌体内α2M的表达水平都有一定量的升高,证明α2M是三角帆蚌基础免疫系统中的组成部分.本研究丰富了软体动物免疫学研究内容,为三角帆蚌抗病机理提供理论资料.
alpha-2巨毬蛋白是河蚌體內重要的天然免疫因子,參與廣汎的免疫防禦和調節.通過RACE法剋隆瞭三角帆蚌α2M全長cDNA序列,提交Genbank,穫得覈苷痠序列登陸號:DQ 993157.1.同時,採用生物信息學方法對alpha-2巨毬蛋白進行瞭繫統分析.該基因cDNA全長5 124 bp,其中編碼區4 836 bp,5'耑非編碼區35 bp,3'耑非編碼區為253 bp(含polyA尾31 bp),該基因能編碼1 611箇氨基痠,其中前23箇氨基痠殘基為信號肽序列,成熟蛋白分子量為177 571.8 u,等電點為5.49.蛋白的不穩定繫數為39.53,錶明該蛋白是穩定的.在此基礎上,以18 S作為內標,利用半定量RT-PCR法檢測α2M基因在三角帆蚌不同組織和不同生理狀態下的錶達情況.結果錶明,alpha-2巨毬蛋白僅在血細胞中有錶達,而在外套膜、閉殼肌、腸和性腺中沒有錶達.經註射大腸桿菌和嗜水氣單胞菌12 h後,三角帆蚌體內α2M的錶達水平都有一定量的升高,證明α2M是三角帆蚌基礎免疫繫統中的組成部分.本研究豐富瞭軟體動物免疫學研究內容,為三角帆蚌抗病機理提供理論資料.
alpha-2거구단백시하방체내중요적천연면역인자,삼여엄범적면역방어화조절.통과RACE법극륭료삼각범방α2M전장cDNA서렬,제교Genbank,획득핵감산서렬등륙호:DQ 993157.1.동시,채용생물신식학방법대alpha-2거구단백진행료계통분석.해기인cDNA전장5 124 bp,기중편마구4 836 bp,5'단비편마구35 bp,3'단비편마구위253 bp(함polyA미31 bp),해기인능편마1 611개안기산,기중전23개안기산잔기위신호태서렬,성숙단백분자량위177 571.8 u,등전점위5.49.단백적불은정계수위39.53,표명해단백시은정적.재차기출상,이18 S작위내표,이용반정량RT-PCR법검측α2M기인재삼각범방불동조직화불동생리상태하적표체정황.결과표명,alpha-2거구단백부재혈세포중유표체,이재외투막、폐각기、장화성선중몰유표체.경주사대장간균화기수기단포균12 h후,삼각범방체내α2M적표체수평도유일정량적승고,증명α2M시삼각범방기출면역계통중적조성부분.본연구봉부료연체동물면역학연구내용,위삼각범방항병궤리제공이론자료.