中国兽医科学
中國獸醫科學
중국수의과학
VETERINARY SCIENCE IN CHINA
2008年
9期
733-737
,共5页
周鹏%张德林%周东辉%宋慧群%林瑞庆%朱兴全
週鵬%張德林%週東輝%宋慧群%林瑞慶%硃興全
주붕%장덕림%주동휘%송혜군%림서경%주흥전
刚地弓形虫%速殖子%抑制消减杂交%消减cDNA文库
剛地弓形蟲%速殖子%抑製消減雜交%消減cDNA文庫
강지궁형충%속식자%억제소감잡교%소감cDNA문고
为筛选刚地弓形虫的毒力相关基因,以弓形虫为研究对象,构建了弓形虫强弱毒株抑制消减Cdna文库.分别收集弓形虫Ⅰ型RH株和Ⅱ型QHO株速殖子,提取总RNA,纯化后获得mRNA,并反转录为cDNA,用抑制消减杂交技术(SSH)构建弓形虫强弱毒株正向消减(弱毒株消减强毒株)及反向消减(强毒株消减弱毒株)cDNA文库.从两文库中各筛选10个阳性克隆测序及进行在线BIAST分析.结果显示,构建的弓形虫强弱毒株的消减cDNA文库具有较强的特异性;在获得的18个有效表达序列标签中,有12个与已报道的基因有较高相似性,另外6个可能代表新基因.表明,弓形虫强弱毒株差异表达消减cDNA文库的成功构建,为进一步研究弓形虫毒力相关基因的功能奠定了基础.
為篩選剛地弓形蟲的毒力相關基因,以弓形蟲為研究對象,構建瞭弓形蟲彊弱毒株抑製消減Cdna文庫.分彆收集弓形蟲Ⅰ型RH株和Ⅱ型QHO株速殖子,提取總RNA,純化後穫得mRNA,併反轉錄為cDNA,用抑製消減雜交技術(SSH)構建弓形蟲彊弱毒株正嚮消減(弱毒株消減彊毒株)及反嚮消減(彊毒株消減弱毒株)cDNA文庫.從兩文庫中各篩選10箇暘性剋隆測序及進行在線BIAST分析.結果顯示,構建的弓形蟲彊弱毒株的消減cDNA文庫具有較彊的特異性;在穫得的18箇有效錶達序列標籤中,有12箇與已報道的基因有較高相似性,另外6箇可能代錶新基因.錶明,弓形蟲彊弱毒株差異錶達消減cDNA文庫的成功構建,為進一步研究弓形蟲毒力相關基因的功能奠定瞭基礎.
위사선강지궁형충적독력상관기인,이궁형충위연구대상,구건료궁형충강약독주억제소감Cdna문고.분별수집궁형충Ⅰ형RH주화Ⅱ형QHO주속식자,제취총RNA,순화후획득mRNA,병반전록위cDNA,용억제소감잡교기술(SSH)구건궁형충강약독주정향소감(약독주소감강독주)급반향소감(강독주소감약독주)cDNA문고.종량문고중각사선10개양성극륭측서급진행재선BIAST분석.결과현시,구건적궁형충강약독주적소감cDNA문고구유교강적특이성;재획득적18개유효표체서렬표첨중,유12개여이보도적기인유교고상사성,령외6개가능대표신기인.표명,궁형충강약독주차이표체소감cDNA문고적성공구건,위진일보연구궁형충독력상관기인적공능전정료기출.
