四川大学学报（医学版）
四川大學學報（醫學版）
사천대학학보（의학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2009年
4期
719-723
,共5页
贾贵清%张明鸣%杨平%程惊秋%陆燕蓉%伍晓汀
賈貴清%張明鳴%楊平%程驚鞦%陸燕蓉%伍曉汀
가귀청%장명명%양평%정량추%륙연용%오효정
间充质干细胞%细胞培养%细胞分离%骨髓%大鼠
間充質榦細胞%細胞培養%細胞分離%骨髓%大鼠
간충질간세포%세포배양%세포분리%골수%대서
目的 探讨获得大量、高纯度、高活性骨髓间充质干细胞(BMSCs)的有效途径.方法 用密度梯度离心法和贴壁法分离纯化BMSCs,在无血清、含小牛或胎牛血清以及不同体积分数的胎牛血清的培养基中培养,传代扩增,观察各组细胞形态、生长特性,测定生长曲线,免疫细胞化学染色鉴定表面抗原,电镜观察细胞显微结构.结果 密度梯度离心法可获得较纯的原代细胞,但细胞增殖缓慢,容易老化;贴壁法分离的细胞生长增殖迅速,经传代换液,第4代细胞基本纯化;小牛和胎牛血清均能促进BMSCs生长增殖,但在体积分数为0.12的胎牛血清中集落形成率最高(46.50%);细胞表达CD44、CD90,而CD14、CD45阴性;电镜下BMSCs符合干细胞的一般特性.结论 经多次换液、严格控制传代消化时间(2～3 min)和酶浓度(2.5 g/L),采用贴壁纯化法在含体积分数为0.12的胎牛血清L-DMEM培养液中培养可获得大量、高纯度、高活性的BMSCs.
目的 探討穫得大量、高純度、高活性骨髓間充質榦細胞(BMSCs)的有效途徑.方法 用密度梯度離心法和貼壁法分離純化BMSCs,在無血清、含小牛或胎牛血清以及不同體積分數的胎牛血清的培養基中培養,傳代擴增,觀察各組細胞形態、生長特性,測定生長麯線,免疫細胞化學染色鑒定錶麵抗原,電鏡觀察細胞顯微結構.結果 密度梯度離心法可穫得較純的原代細胞,但細胞增殖緩慢,容易老化;貼壁法分離的細胞生長增殖迅速,經傳代換液,第4代細胞基本純化;小牛和胎牛血清均能促進BMSCs生長增殖,但在體積分數為0.12的胎牛血清中集落形成率最高(46.50%);細胞錶達CD44、CD90,而CD14、CD45陰性;電鏡下BMSCs符閤榦細胞的一般特性.結論 經多次換液、嚴格控製傳代消化時間(2～3 min)和酶濃度(2.5 g/L),採用貼壁純化法在含體積分數為0.12的胎牛血清L-DMEM培養液中培養可穫得大量、高純度、高活性的BMSCs.
목적 탐토획득대량、고순도、고활성골수간충질간세포(BMSCs)적유효도경.방법 용밀도제도리심법화첩벽법분리순화BMSCs,재무혈청、함소우혹태우혈청이급불동체적분수적태우혈청적배양기중배양,전대확증,관찰각조세포형태、생장특성,측정생장곡선,면역세포화학염색감정표면항원,전경관찰세포현미결구.결과 밀도제도리심법가획득교순적원대세포,단세포증식완만,용역노화;첩벽법분리적세포생장증식신속,경전대환액,제4대세포기본순화;소우화태우혈청균능촉진BMSCs생장증식,단재체적분수위0.12적태우혈청중집락형성솔최고(46.50%);세포표체CD44、CD90,이CD14、CD45음성;전경하BMSCs부합간세포적일반특성.결론 경다차환액、엄격공제전대소화시간(2～3 min)화매농도(2.5 g/L),채용첩벽순화법재함체적분수위0.12적태우혈청L-DMEM배양액중배양가획득대량、고순도、고활성적BMSCs.
