CAJ | 학술논문

背景与目的:前期研究表明,陡脉冲电场对肿瘤细胞具有明显的杀伤作用,但其确切机制尚不清楚.本文拟探讨不同剂量陡脉冲对细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)和细胞膜电位的影响.方法:将乳腺癌细胞MDA-MB-231分为对照组和5个不同剂量能量可控陡脉冲(energy controllable steep pulses,ECSP)处理组,分别用荧光探针Fho-3/AM标记Ca2+、DiBAC4(3)标记细胞膜电位,应用激光共聚焦显微镜静态观察不同剂量ECSP处理后乳腺癌细胞内荧光探针的平均荧光强度,分析细胞内Ca2+浓度的变化以及细胞膜电位的改变.同时观察细胞胞外有或无钙离子时,ECSP对细胞内游离Ca2+浓度的影响.结果:静态观察发现在细胞受到能量较低电场刺激后,细胞外钙内流;当能量增大后,细胞内钙大量外流.实时动态观察发现在低能量的脉冲处理时,细胞内Ca2+的荧光强度和上升速率随脉冲电场强度的增加而增加;但当能量达到电压285 V、频率100 Hz时.荧光强度反而呈现明显的下降.在没有外Ca2+的情况下,细胞内Ca2+浓度的增加虽然与有外钙时相比显著下降,但在脉冲电场作用下在脉冲电场作用下仍缓慢上升.低剂量的ECSP可诱导细胞DiBAC4(3)的荧光强度增强,表明细胞发生去极化;但当剂量继续增加时,细胞DiBAC4(3)的荧光强度反而减弱,表明细胞发生超极化.结论:低能量陡脉冲可使细胞膜发生去极化,诱导细胞外钙离子内流:高能量陡脉冲可直接破坏细胞膜,使细胞膜发生超极化,诱导细胞内钙离子外流,导致肿瘤细胞发生坏死.
배경여목적:전기연구표명,두맥충전장대종류세포구유명현적살상작용,단기학절궤제상불청초.본문의탐토불동제량두맥충대세포내유리Ca2+농도([Ca2+]i)화세포막전위적영향.방법:장유선암세포MDA-MB-231분위대조조화5개불동제량능량가공두맥충(energy controllable steep pulses,ECSP)처리조,분별용형광탐침Fho-3/AM표기Ca2+、DiBAC4(3)표기세포막전위,응용격광공취초현미경정태관찰불동제량ECSP처리후유선암세포내형광탐침적평균형광강도,분석세포내Ca2+농도적변화이급세포막전위적개변.동시관찰세포포외유혹무개리자시,ECSP대세포내유리Ca2+농도적영향.결과:정태관찰발현재세포수도능량교저전장자격후,세포외개내류;당능량증대후,세포내개대량외류.실시동태관찰발현재저능량적맥충처리시,세포내Ca2+적형광강도화상승속솔수맥충전장강도적증가이증가;단당능량체도전압285 V、빈솔100 Hz시.형광강도반이정현명현적하강.재몰유외Ca2+적정황하,세포내Ca2+농도적증가수연여유외개시상비현저하강,단재맥충전장작용하재맥충전장작용하잉완만상승.저제량적ECSP가유도세포DiBAC4(3)적형광강도증강,표명세포발생거겁화;단당제량계속증가시,세포DiBAC4(3)적형광강도반이감약,표명세포발생초겁화.결론:저능량두맥충가사세포막발생거겁화,유도세포외개리자내류:고능량두맥충가직접파배세포막,사세포막발생초겁화,유도세포내개리자외류,도치종류세포발생배사.