四川医学
四川醫學
사천의학
SICHUAN MEDICAL JOURNAL
2009年
6期
807-810
,共4页
袁成良%邹自英%魏世刚%李永忠%刘定海%刘利洪
袁成良%鄒自英%魏世剛%李永忠%劉定海%劉利洪
원성량%추자영%위세강%리영충%류정해%류리홍
RNA干扰%树突状细胞%B7%皮肤移植%免疫抑制
RNA榦擾%樹突狀細胞%B7%皮膚移植%免疫抑製
RNA간우%수돌상세포%B7%피부이식%면역억제
目的 探讨RNA干扰技术阻断B7/CD28共刺激信号对小鼠异体皮肤移植排斥反应的影响.方法 设计并合成B7特异性siRNA,在脂质体的介导下转染树突状细胞,转染后72h收集细胞,用蛋白印迹法检测B7-1、B7-2蛋白的表达.在小鼠异体皮肤移植前7d,经静脉将转染B7特异性siRNA的DC输入小鼠体内(DC转染组),同时设立同种异体移植对照组、同系移植对照组、环孢素A(CsA)治疗组(术后每日皮下注射CsA 5 mg/kg)和未转染DC组(移植前输注未转染DC),观察各组移植皮瓣的存活时间和排斥反应情况,并用MTT法检测混合淋巴细胞增殖反应,术后1个月观察迟发性超敏反应情况.结果 Westem Blot结果 显示转染72h后,siRNA1对B7-1蛋白表达的抑制率为(77.2±6.26)%;siRNA2对B7-2蛋白表达的抑制率为(73.3±5.42)%.与同种异体移植对照组和未转染DC组比较,DC转染组移植皮瓣成活时间明显延长(P＜0.01),组织排斥反应程度较轻,混合淋巴细胞反应和DTH反应显著降低(P＜0.01).结论 B7特异性siRNA可明显抑制树突细胞B7基因的表达,以阻断B7/CD28共刺激通路,抑制小鼠皮肤移植排斥反应,为进一步研究siRNA诱导免疫耐受提供了新方法 .
目的 探討RNA榦擾技術阻斷B7/CD28共刺激信號對小鼠異體皮膚移植排斥反應的影響.方法 設計併閤成B7特異性siRNA,在脂質體的介導下轉染樹突狀細胞,轉染後72h收集細胞,用蛋白印跡法檢測B7-1、B7-2蛋白的錶達.在小鼠異體皮膚移植前7d,經靜脈將轉染B7特異性siRNA的DC輸入小鼠體內(DC轉染組),同時設立同種異體移植對照組、同繫移植對照組、環孢素A(CsA)治療組(術後每日皮下註射CsA 5 mg/kg)和未轉染DC組(移植前輸註未轉染DC),觀察各組移植皮瓣的存活時間和排斥反應情況,併用MTT法檢測混閤淋巴細胞增殖反應,術後1箇月觀察遲髮性超敏反應情況.結果 Westem Blot結果 顯示轉染72h後,siRNA1對B7-1蛋白錶達的抑製率為(77.2±6.26)%;siRNA2對B7-2蛋白錶達的抑製率為(73.3±5.42)%.與同種異體移植對照組和未轉染DC組比較,DC轉染組移植皮瓣成活時間明顯延長(P＜0.01),組織排斥反應程度較輕,混閤淋巴細胞反應和DTH反應顯著降低(P＜0.01).結論 B7特異性siRNA可明顯抑製樹突細胞B7基因的錶達,以阻斷B7/CD28共刺激通路,抑製小鼠皮膚移植排斥反應,為進一步研究siRNA誘導免疫耐受提供瞭新方法 .
목적 탐토RNA간우기술조단B7/CD28공자격신호대소서이체피부이식배척반응적영향.방법 설계병합성B7특이성siRNA,재지질체적개도하전염수돌상세포,전염후72h수집세포,용단백인적법검측B7-1、B7-2단백적표체.재소서이체피부이식전7d,경정맥장전염B7특이성siRNA적DC수입소서체내(DC전염조),동시설립동충이체이식대조조、동계이식대조조、배포소A(CsA)치료조(술후매일피하주사CsA 5 mg/kg)화미전염DC조(이식전수주미전염DC),관찰각조이식피판적존활시간화배척반응정황,병용MTT법검측혼합림파세포증식반응,술후1개월관찰지발성초민반응정황.결과 Westem Blot결과 현시전염72h후,siRNA1대B7-1단백표체적억제솔위(77.2±6.26)%;siRNA2대B7-2단백표체적억제솔위(73.3±5.42)%.여동충이체이식대조조화미전염DC조비교,DC전염조이식피판성활시간명현연장(P＜0.01),조직배척반응정도교경,혼합림파세포반응화DTH반응현저강저(P＜0.01).결론 B7특이성siRNA가명현억제수돌세포B7기인적표체,이조단B7/CD28공자격통로,억제소서피부이식배척반응,위진일보연구siRNA유도면역내수제공료신방법 .
