实验动物与比较医学
實驗動物與比較醫學
실험동물여비교의학
LABORATORY ANIMAL AND COMPARATIVE MEDICINE
2010年
5期
322-328
,共7页
孙莲花%陈燕%麻孙恺%迟俊%匡颖%顾鸣敏%王铸钢
孫蓮花%陳燕%痳孫愷%遲俊%劻穎%顧鳴敏%王鑄鋼
손연화%진연%마손개%지준%광영%고명민%왕주강
TAFA2基因%脑组织特异表达基因%基因剔除
TAFA2基因%腦組織特異錶達基因%基因剔除
TAFA2기인%뇌조직특이표체기인%기인척제
目的 建立TAFA2基因剔除小鼠模型,为在体研究TAFA2基因的生物学功能及其与中枢神经系统发生、发育的关系创造条件. 方法 运用生物信息学手段确定小鼠TAFA2基因组的序列,设计基因剔除策略,构建基因剔除载体pBR322-MK-MCS-TAFA2,以电穿孔方法将基因剔除载体导入ES细胞,用G418和Ganciclovoir进行正负筛选,获得双抗性克隆,PCR鉴定出正确同源重组的ES细胞克隆. 结果 同源重组的ES细胞注入小鼠囊胚后获得嵌合体小鼠,嵌合体小鼠与C57BL/6J小鼠交配后获得Aguoti(野生型)毛色的小鼠41只,其中14只为TAFA2基因剔除杂合子小鼠,阳性率为34.1%.在雌、雄杂合子小鼠交配的后代中获得纯合子小鼠,初步的表型观察未发现TAFA2基因剔除小鼠出现异常改变. 结论 已成功建立了TAFA2基因剔除小鼠模型,其中纯合子小鼠未出现胚胎致死现象.
目的 建立TAFA2基因剔除小鼠模型,為在體研究TAFA2基因的生物學功能及其與中樞神經繫統髮生、髮育的關繫創造條件. 方法 運用生物信息學手段確定小鼠TAFA2基因組的序列,設計基因剔除策略,構建基因剔除載體pBR322-MK-MCS-TAFA2,以電穿孔方法將基因剔除載體導入ES細胞,用G418和Ganciclovoir進行正負篩選,穫得雙抗性剋隆,PCR鑒定齣正確同源重組的ES細胞剋隆. 結果 同源重組的ES細胞註入小鼠囊胚後穫得嵌閤體小鼠,嵌閤體小鼠與C57BL/6J小鼠交配後穫得Aguoti(野生型)毛色的小鼠41隻,其中14隻為TAFA2基因剔除雜閤子小鼠,暘性率為34.1%.在雌、雄雜閤子小鼠交配的後代中穫得純閤子小鼠,初步的錶型觀察未髮現TAFA2基因剔除小鼠齣現異常改變. 結論 已成功建立瞭TAFA2基因剔除小鼠模型,其中純閤子小鼠未齣現胚胎緻死現象.
목적 건립TAFA2기인척제소서모형,위재체연구TAFA2기인적생물학공능급기여중추신경계통발생、발육적관계창조조건. 방법 운용생물신식학수단학정소서TAFA2기인조적서렬,설계기인척제책략,구건기인척제재체pBR322-MK-MCS-TAFA2,이전천공방법장기인척제재체도입ES세포,용G418화Ganciclovoir진행정부사선,획득쌍항성극륭,PCR감정출정학동원중조적ES세포극륭. 결과 동원중조적ES세포주입소서낭배후획득감합체소서,감합체소서여C57BL/6J소서교배후획득Aguoti(야생형)모색적소서41지,기중14지위TAFA2기인척제잡합자소서,양성솔위34.1%.재자、웅잡합자소서교배적후대중획득순합자소서,초보적표형관찰미발현TAFA2기인척제소서출현이상개변. 결론 이성공건립료TAFA2기인척제소서모형,기중순합자소서미출현배태치사현상.
