CAJ | 학술논문

目的研究不同骨髓细胞培养方法对大鼠破骨细胞样细胞(OLC)诱导分化及活性的影响.方法大鼠骨髓细胞以巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)作用后与核因子κB受体活化因子配体(RANKL)协同诱导OLC分化,采用全骨髓细胞(A组)及密度梯度离心后骨髓单个核细胞(B组)两种培养方法,通过倒置相差显微镜及细胞染色观察两组OLC分化数量的差异,通过骨吸收陷窝分析及OLC膜表面整合素β3(CD61)表达量比较两组OLC活性的差异.结果 B组培养5、7 d抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色阳性多核OLC数量及TRAP活性均高于A组,骨吸收陷窝计数亦较A组为多,差异均有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05);陷窝面积比培养早期两组比较差异无统计学意义,7 d时B组大于A组,差异有统计学意义(P＜0.01);OLC膜表面CD61表达量及平均荧光强度0及3 d时B组均较A组明显增高,随培养时间延长组间比较差异无统计学意义.结论低转速、短时间密度梯度离心后骨髓细胞培养诱导OLC分化获得的细胞数量较多且不影响其活性,是一种简便有效的OLC培养方法.
목적연구불동골수세포배양방법대대서파골세포양세포(OLC)유도분화급활성적영향.방법대서골수세포이거서세포집락자격인자(M-CSF)작용후여핵인자κB수체활화인자배체(RANKL)협동유도OLC분화,채용전골수세포(A조)급밀도제도리심후골수단개핵세포(B조)량충배양방법,통과도치상차현미경급세포염색관찰량조OLC분화수량적차이,통과골흡수함와분석급OLC막표면정합소β3(CD61)표체량비교량조OLC활성적차이.결과 B조배양5、7 d항주석산산성린산매(TRAP)염색양성다핵OLC수량급TRAP활성균고우A조,골흡수함와계수역교A조위다,차이균유통계학의의(P＜0.01,P＜0.05);함와면적비배양조기량조비교차이무통계학의의,7 d시B조대우A조,차이유통계학의의(P＜0.01);OLC막표면CD61표체량급평균형광강도0급3 d시B조균교A조명현증고,수배양시간연장조간비교차이무통계학의의.결론저전속、단시간밀도제도리심후골수세포배양유도OLC분화획득적세포수량교다차불영향기활성,시일충간편유효적OLC배양방법.