中华医学杂志
中華醫學雜誌
중화의학잡지
National Medical Journal of China
2002年
5期
338-340
,共3页
朱红霞%刘爽%周翠琦%周晓波%张帆%全兰平%徐宁志
硃紅霞%劉爽%週翠琦%週曉波%張帆%全蘭平%徐寧誌
주홍하%류상%주취기%주효파%장범%전란평%서저지
基因表达%细胞转化,肿瘤
基因錶達%細胞轉化,腫瘤
기인표체%세포전화,종류
目的探讨抗凋亡基因survivin在细胞转化中的作用机制.方法利用RT-PCR获得survivin编码区序列,双酶切后,将其定向克隆至原核和真核表达载体;生长曲线观察高表达survivin对细胞增殖的影响;软琼脂集落形成实验观察细胞的接触抑制生长能力;Western Blot检测survivin高表达引起的蛋白质分子改变.结果通过分子克隆,构建survivin原核和真核表达载体,并可在大肠杆菌和真核细胞中表达.生长曲线表明,转染survivin的293细胞的增殖速度略快于对照细胞,尤其在细胞生长至高密度时;Survivin可以明显提高293细胞的软琼脂集落形成能力;Survivin的高表达可以引起癌基因cyclin D1和c-myc的蛋白表达水平增高.结论抗凋亡基因survivin具有促进细胞转化的作用,这种作用可能依赖于cyclin D1和c-myc的功能.
目的探討抗凋亡基因survivin在細胞轉化中的作用機製.方法利用RT-PCR穫得survivin編碼區序列,雙酶切後,將其定嚮剋隆至原覈和真覈錶達載體;生長麯線觀察高錶達survivin對細胞增殖的影響;軟瓊脂集落形成實驗觀察細胞的接觸抑製生長能力;Western Blot檢測survivin高錶達引起的蛋白質分子改變.結果通過分子剋隆,構建survivin原覈和真覈錶達載體,併可在大腸桿菌和真覈細胞中錶達.生長麯線錶明,轉染survivin的293細胞的增殖速度略快于對照細胞,尤其在細胞生長至高密度時;Survivin可以明顯提高293細胞的軟瓊脂集落形成能力;Survivin的高錶達可以引起癌基因cyclin D1和c-myc的蛋白錶達水平增高.結論抗凋亡基因survivin具有促進細胞轉化的作用,這種作用可能依賴于cyclin D1和c-myc的功能.
목적탐토항조망기인survivin재세포전화중적작용궤제.방법이용RT-PCR획득survivin편마구서렬,쌍매절후,장기정향극륭지원핵화진핵표체재체;생장곡선관찰고표체survivin대세포증식적영향;연경지집락형성실험관찰세포적접촉억제생장능력;Western Blot검측survivin고표체인기적단백질분자개변.결과통과분자극륭,구건survivin원핵화진핵표체재체,병가재대장간균화진핵세포중표체.생장곡선표명,전염survivin적293세포적증식속도략쾌우대조세포,우기재세포생장지고밀도시;Survivin가이명현제고293세포적연경지집락형성능력;Survivin적고표체가이인기암기인cyclin D1화c-myc적단백표체수평증고.결론항조망기인survivin구유촉진세포전화적작용,저충작용가능의뢰우cyclin D1화c-myc적공능.
