中华实验外科杂志
中華實驗外科雜誌
중화실험외과잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL SURGERY
2006年
2期
230-232
,共3页
史留斌%宋宁%芮晓晖%张浩%王乾伟%石伟%钱建民
史留斌%宋寧%芮曉暉%張浩%王乾偉%石偉%錢建民
사류빈%송저%예효휘%장호%왕건위%석위%전건민
缺氧/复氧损伤%再灌注损伤%内皮细胞%缺氧诱导因子-1α
缺氧/複氧損傷%再灌註損傷%內皮細胞%缺氧誘導因子-1α
결양/복양손상%재관주손상%내피세포%결양유도인자-1α
目的研究缺氧预适应对内皮细胞冷缺氧/温复氧损伤的作用及可能机制.方法培养的内皮细胞ECV-304分成4组,A组,对照组;B组,冷缺氧/温复氧(A/R)组95%N2/5%CO2缺氧装置中用4℃UW液保存24 h;C组,缺氧预适应组(APC),内皮细胞在缺氧前遭受4个循环短时间缺氧/复氧;D组,缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)抑制组:缺氧预适应前,细胞培养液中加入5μmol/L的HIF-1α抑制剂NS398,余同C组.缺氧结束后,各组37℃5%CO2 95%空气中复氧6 h.分别以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法、Western blot法检测各组HIF-1α mRNA和蛋白表达,内皮细胞保护作用通过细胞存活率(台盼蓝拒染法)、LDH释出率及ICAM-1的表达判定.结果缺氧预适应明显上调HIF-1α mRNA和蛋白表达,显著抑制冷保存内皮细胞缺氧/复氧损伤,表现为更高的细胞存活率,更少的LDH释出和ICAM-1的表达.而HIF-1α抑制剂可逆转这种保护作用.结论缺氧预适应能有效地抑制冷保存内皮细胞缺氧/复氧损伤,这种细胞保护作用可能是通过HIF-1α介导的.
目的研究缺氧預適應對內皮細胞冷缺氧/溫複氧損傷的作用及可能機製.方法培養的內皮細胞ECV-304分成4組,A組,對照組;B組,冷缺氧/溫複氧(A/R)組95%N2/5%CO2缺氧裝置中用4℃UW液保存24 h;C組,缺氧預適應組(APC),內皮細胞在缺氧前遭受4箇循環短時間缺氧/複氧;D組,缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)抑製組:缺氧預適應前,細胞培養液中加入5μmol/L的HIF-1α抑製劑NS398,餘同C組.缺氧結束後,各組37℃5%CO2 95%空氣中複氧6 h.分彆以逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)法、Western blot法檢測各組HIF-1α mRNA和蛋白錶達,內皮細胞保護作用通過細胞存活率(檯盼藍拒染法)、LDH釋齣率及ICAM-1的錶達判定.結果缺氧預適應明顯上調HIF-1α mRNA和蛋白錶達,顯著抑製冷保存內皮細胞缺氧/複氧損傷,錶現為更高的細胞存活率,更少的LDH釋齣和ICAM-1的錶達.而HIF-1α抑製劑可逆轉這種保護作用.結論缺氧預適應能有效地抑製冷保存內皮細胞缺氧/複氧損傷,這種細胞保護作用可能是通過HIF-1α介導的.
목적연구결양예괄응대내피세포랭결양/온복양손상적작용급가능궤제.방법배양적내피세포ECV-304분성4조,A조,대조조;B조,랭결양/온복양(A/R)조95%N2/5%CO2결양장치중용4℃UW액보존24 h;C조,결양예괄응조(APC),내피세포재결양전조수4개순배단시간결양/복양;D조,결양유도인자-1α(HIF-1α)억제조:결양예괄응전,세포배양액중가입5μmol/L적HIF-1α억제제NS398,여동C조.결양결속후,각조37℃5%CO2 95%공기중복양6 h.분별이역전록-취합매련반응(RT-PCR)법、Western blot법검측각조HIF-1α mRNA화단백표체,내피세포보호작용통과세포존활솔(태반람거염법)、LDH석출솔급ICAM-1적표체판정.결과결양예괄응명현상조HIF-1α mRNA화단백표체,현저억제랭보존내피세포결양/복양손상,표현위경고적세포존활솔,경소적LDH석출화ICAM-1적표체.이HIF-1α억제제가역전저충보호작용.결론결양예괄응능유효지억제랭보존내피세포결양/복양손상,저충세포보호작용가능시통과HIF-1α개도적.
