动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2012年
7期
18-22
,共5页
李庆阳%陈芳艳%刘平%谢永福%冯金牛%况少祥%陈瑞爱%唐秀英%王林川
李慶暘%陳芳豔%劉平%謝永福%馮金牛%況少祥%陳瑞愛%唐秀英%王林川
리경양%진방염%류평%사영복%풍금우%황소상%진서애%당수영%왕림천
鸭坦布苏病毒%TaqMan探针%荧光定量RT-PCR
鴨坦佈囌病毒%TaqMan探針%熒光定量RT-PCR
압탄포소병독%TaqMan탐침%형광정량RT-PCR
根据鸭坦布苏病毒(DTMUV) BYD-1株基因序列设计特异性引物和TaqMan探针,建立了快速检测DTMUV的实时荧光定量RT-PCR方法.特异性结果显示,DTMUV显示阳性,而3株非鸭坦布苏病毒均显示阴性,说明该方法具有高度特异性.其表达式为C1＝-3.32×1g Copy number +41.151,R2＝0.998,R循环效率Eff％＝100.072,DNA拷贝数在101～108范围内检测曲线有良好的线性关系,对质粒标准品最低检测限为1.0×101拷贝/μL,变异系数低于5％.利用该方法分别对攻毒感染具有典型鸭新型黄病毒病临床症状和病理变化的蛋鸭的脾脏和肝脏组织进行检测,阳性率均为100％,而用本实验室建立的普通RT-PCR方法检测的阳性检测率为85％(17/20)和75％(15/20).建立的方法具有敏感性高、特异性好、稳定性强的特点,可用DTMUV早期感染的快速诊断和流行病学调查.
根據鴨坦佈囌病毒(DTMUV) BYD-1株基因序列設計特異性引物和TaqMan探針,建立瞭快速檢測DTMUV的實時熒光定量RT-PCR方法.特異性結果顯示,DTMUV顯示暘性,而3株非鴨坦佈囌病毒均顯示陰性,說明該方法具有高度特異性.其錶達式為C1＝-3.32×1g Copy number +41.151,R2＝0.998,R循環效率Eff％＝100.072,DNA拷貝數在101～108範圍內檢測麯線有良好的線性關繫,對質粒標準品最低檢測限為1.0×101拷貝/μL,變異繫數低于5％.利用該方法分彆對攻毒感染具有典型鴨新型黃病毒病臨床癥狀和病理變化的蛋鴨的脾髒和肝髒組織進行檢測,暘性率均為100％,而用本實驗室建立的普通RT-PCR方法檢測的暘性檢測率為85％(17/20)和75％(15/20).建立的方法具有敏感性高、特異性好、穩定性彊的特點,可用DTMUV早期感染的快速診斷和流行病學調查.
근거압탄포소병독(DTMUV) BYD-1주기인서렬설계특이성인물화TaqMan탐침,건립료쾌속검측DTMUV적실시형광정량RT-PCR방법.특이성결과현시,DTMUV현시양성,이3주비압탄포소병독균현시음성,설명해방법구유고도특이성.기표체식위C1＝-3.32×1g Copy number +41.151,R2＝0.998,R순배효솔Eff％＝100.072,DNA고패수재101～108범위내검측곡선유량호적선성관계,대질립표준품최저검측한위1.0×101고패/μL,변이계수저우5％.이용해방법분별대공독감염구유전형압신형황병독병림상증상화병리변화적단압적비장화간장조직진행검측,양성솔균위100％,이용본실험실건립적보통RT-PCR방법검측적양성검측솔위85％(17/20)화75％(15/20).건립적방법구유민감성고、특이성호、은정성강적특점,가용DTMUV조기감염적쾌속진단화류행병학조사.
