Panton-Valentine杀白细胞素原核表达、纯化及生物学活性鉴定
Panton-Valentine살백세포소원핵표체、순화급생물학활성감정
Prokaryotic expression and biological activity identification of the Panton-Valentine leukocidin of Staphylococcus aureus
  • 万方数据
    安徽医科大学学报 안휘의과대학학보
    ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
    2011年 1期 6-10 ,共5页

    常文娇%马筱玲%沈继龙%高朋%戴媛媛%张翠萍%周馨%周文静

    상문교%마소령%침계룡%고붕%대원원%장취평%주형%주문정

    杀白细胞素类/遗传学%基因表达%细胞凋亡%葡萄球菌,金黄色 殺白細胞素類/遺傳學%基因錶達%細胞凋亡%葡萄毬菌,金黃色
    살백세포소류/유전학%기인표체%세포조망%포도구균,금황색
    目的 原核表达金黄色葡萄球菌Panton-Valentine杀白细胞素(PVL)蛋白,并进行生物学活性鉴定.方法 提取PVL阳性金黄色葡萄球菌DNA,利用PCR扩增LukF-PV和LukS-PV编码基因,亚克隆入表达载体pET28a,转化入大肠埃希菌(E.coli)BL21株,经异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,纯化后获得可溶性的蛋白,Western blot对其鉴定.并以人多形核粒细胞(PMNs)为靶细胞检测其生物学活性.结果 成功构建了LukF-PV 和LukS-PV 基因的表达载体,经IPTG诱导和亲和层析纯化法获得重组蛋白,Western blot鉴定证实其为重组PVL蛋白.实验表明该蛋白具有诱导人多形核粒细胞(PMNs)凋亡的作用.结论 成功地表达获得了具有生物学活性的PVL重组蛋白,为PVL快速检测方法的建立和致病机制研究奠定基础.
    목적 원핵표체금황색포도구균Panton-Valentine살백세포소(PVL)단백,병진행생물학활성감정.방법 제취PVL양성금황색포도구균DNA,이용PCR확증LukF-PV화LukS-PV편마기인,아극륭입표체재체pET28a,전화입대장애희균(E.coli)BL21주,경이병기-β-D류대반유당감(IPTG)유도표체,순화후획득가용성적단백,Western blot대기감정.병이인다형핵립세포(PMNs)위파세포검측기생물학활성.결과 성공구건료LukF-PV 화LukS-PV 기인적표체재체,경IPTG유도화친화층석순화법획득중조단백,Western blot감정증실기위중조PVL단백.실험표명해단백구유유도인다형핵립세포(PMNs)조망적작용.결론 성공지표체획득료구유생물학활성적PVL중조단백,위PVL쾌속검측방법적건립화치병궤제연구전정기출.
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