中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2010年
3期
744-748
,共5页
薛雷喜%江淼%谢丽倩%阮长耿
薛雷喜%江淼%謝麗倩%阮長耿
설뢰희%강묘%사려천%원장경
硼替佐米%内皮细胞株HMEC-1%VEGF
硼替佐米%內皮細胞株HMEC-1%VEGF
붕체좌미%내피세포주HMEC-1%VEGF
本研究探讨硼替佐米对内皮细胞株HMEC-1VEGF基因表达的影响,并检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)转录调节活性和膜联蛋白A2(Annexin A2)表达强度的变化以分析VEGF基因表达变化可能的机制.用细胞计数试剂盒CCK-8检测细胞的相对增殖活力;采用实时定量PCR检测VEGF基因表达强度,RT-PCR检测碳酸酐酶Ⅸ(CA Ⅸ)的基因表达强度,用实时定量PCR和Western blot分别检测Annexin A2在基因和蛋白水平的变化.结果表明:2.5、5.0、10 nmol/L硼替佐米作用12小时,内皮细胞株HMEC-1 VEGF基因表达强度分别为:0.730±0.106、0.673±0.153、0.767±0.090(0 nmol/L时为1.0)(p＜0.05);2.5、5.0 nmol/L药物未明显抑制细胞的增殖活力(p＞0.05),10 nmol/L时细胞增殖则明显被抑制(p=0.024),不同浓度硼替佐米处理后,CAⅨ基因表达强度均明显降低,HIF-1α转录调节活性受到抑制;Annexin A2蛋白的表达也明显受抑.结论:低剂量的硼替佐米对蛋白酶体活性无明显抑制作用;硼替佐米可能通过调节内皮细胞HIF-1α的活性和Annexin A2蛋白的表达下调VEGF基因的表达水平.
本研究探討硼替佐米對內皮細胞株HMEC-1VEGF基因錶達的影響,併檢測低氧誘導因子-1α(HIF-1α)轉錄調節活性和膜聯蛋白A2(Annexin A2)錶達彊度的變化以分析VEGF基因錶達變化可能的機製.用細胞計數試劑盒CCK-8檢測細胞的相對增殖活力;採用實時定量PCR檢測VEGF基因錶達彊度,RT-PCR檢測碳痠酐酶Ⅸ(CA Ⅸ)的基因錶達彊度,用實時定量PCR和Western blot分彆檢測Annexin A2在基因和蛋白水平的變化.結果錶明:2.5、5.0、10 nmol/L硼替佐米作用12小時,內皮細胞株HMEC-1 VEGF基因錶達彊度分彆為:0.730±0.106、0.673±0.153、0.767±0.090(0 nmol/L時為1.0)(p＜0.05);2.5、5.0 nmol/L藥物未明顯抑製細胞的增殖活力(p＞0.05),10 nmol/L時細胞增殖則明顯被抑製(p=0.024),不同濃度硼替佐米處理後,CAⅨ基因錶達彊度均明顯降低,HIF-1α轉錄調節活性受到抑製;Annexin A2蛋白的錶達也明顯受抑.結論:低劑量的硼替佐米對蛋白酶體活性無明顯抑製作用;硼替佐米可能通過調節內皮細胞HIF-1α的活性和Annexin A2蛋白的錶達下調VEGF基因的錶達水平.
본연구탐토붕체좌미대내피세포주HMEC-1VEGF기인표체적영향,병검측저양유도인자-1α(HIF-1α)전록조절활성화막련단백A2(Annexin A2)표체강도적변화이분석VEGF기인표체변화가능적궤제.용세포계수시제합CCK-8검측세포적상대증식활력;채용실시정량PCR검측VEGF기인표체강도,RT-PCR검측탄산항매Ⅸ(CA Ⅸ)적기인표체강도,용실시정량PCR화Western blot분별검측Annexin A2재기인화단백수평적변화.결과표명:2.5、5.0、10 nmol/L붕체좌미작용12소시,내피세포주HMEC-1 VEGF기인표체강도분별위:0.730±0.106、0.673±0.153、0.767±0.090(0 nmol/L시위1.0)(p＜0.05);2.5、5.0 nmol/L약물미명현억제세포적증식활력(p＞0.05),10 nmol/L시세포증식칙명현피억제(p=0.024),불동농도붕체좌미처리후,CAⅨ기인표체강도균명현강저,HIF-1α전록조절활성수도억제;Annexin A2단백적표체야명현수억.결론:저제량적붕체좌미대단백매체활성무명현억제작용;붕체좌미가능통과조절내피세포HIF-1α적활성화Annexin A2단백적표체하조VEGF기인적표체수평.
