畜牧市场
畜牧市場
축목시장
STOCKBREEDLNDG MARKET
2009年
8期
11-14
,共4页
王先炜%姜平%李玉峰%蒋文明%汤景元
王先煒%薑平%李玉峰%蔣文明%湯景元
왕선위%강평%리옥봉%장문명%탕경원
Ⅱ型猪圆环病毒%Cap蛋白%重组%腺病毒%构建
Ⅱ型豬圓環病毒%Cap蛋白%重組%腺病毒%構建
Ⅱ형저원배병독%Cap단백%중조%선병독%구건
猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)是近年来新发现的引起仔猪多系统衰弱综合症的必需病原,含有两个主要的阅读框ORF1和ORF2,分别编码复制相关蛋白(Rep)和核衣壳蛋白(Cap),其中Cap含有病毒主要抗原表位,是研究PCV2基因工程苗的主要候选目的基因.本研究利用PCR技术将Cap蛋白基因克隆入人5型腺病毒穿梭载体(pShuttle-CMV),与腺病毒骨架载体(pAdEasyTM)共转化大肠杆菌BJ5183进行同源重组并转染HEK-293A细胞,经多次亚克隆获得了重组腺病毒rAd-Cap,测定其TCID50为1 013.7/mL.用RT-PCR、间接ELISA、Westernblot和IPMA等方法证明了Cap蛋白在腺病毒中获得表达.该研究为发展PCV2的重组腺病毒基因工程疫苗奠定了基础.
豬圓環病毒Ⅱ型(PCV2)是近年來新髮現的引起仔豬多繫統衰弱綜閤癥的必需病原,含有兩箇主要的閱讀框ORF1和ORF2,分彆編碼複製相關蛋白(Rep)和覈衣殼蛋白(Cap),其中Cap含有病毒主要抗原錶位,是研究PCV2基因工程苗的主要候選目的基因.本研究利用PCR技術將Cap蛋白基因剋隆入人5型腺病毒穿梭載體(pShuttle-CMV),與腺病毒骨架載體(pAdEasyTM)共轉化大腸桿菌BJ5183進行同源重組併轉染HEK-293A細胞,經多次亞剋隆穫得瞭重組腺病毒rAd-Cap,測定其TCID50為1 013.7/mL.用RT-PCR、間接ELISA、Westernblot和IPMA等方法證明瞭Cap蛋白在腺病毒中穫得錶達.該研究為髮展PCV2的重組腺病毒基因工程疫苗奠定瞭基礎.
저원배병독Ⅱ형(PCV2)시근년래신발현적인기자저다계통쇠약종합증적필수병원,함유량개주요적열독광ORF1화ORF2,분별편마복제상관단백(Rep)화핵의각단백(Cap),기중Cap함유병독주요항원표위,시연구PCV2기인공정묘적주요후선목적기인.본연구이용PCR기술장Cap단백기인극륭입인5형선병독천사재체(pShuttle-CMV),여선병독골가재체(pAdEasyTM)공전화대장간균BJ5183진행동원중조병전염HEK-293A세포,경다차아극륭획득료중조선병독rAd-Cap,측정기TCID50위1 013.7/mL.용RT-PCR、간접ELISA、Westernblot화IPMA등방법증명료Cap단백재선병독중획득표체.해연구위발전PCV2적중조선병독기인공정역묘전정료기출.
