医学综述
醫學綜述
의학종술
MEDICAL RECAPITULATE
2008年
20期
3055-3057
,共3页
大规模并行焦磷酸测序%平行乳液聚合酶链反应%光纤芯片
大規模併行焦燐痠測序%平行乳液聚閤酶鏈反應%光纖芯片
대규모병행초린산측서%평행유액취합매련반응%광섬심편
在后基因组时代,基因研究的焦点已经转移到每个人的基因组,因此迫切需要高通量的测序方法.近几年,出现了基于焦磷酸的新测序方法--大规模并行焦磷酸测序技术.在这项技术中,双链DNA首先被片段化,每单个寡核苷酸链分子结合到磁珠支持物上,用乳液PCR对结合的片段进行扩增.扩增后的片段-磁珠复合物被分别置于光纤芯片上的皮升级反应容器中.然后将DNA聚合酶、ATP硫酸化酶、荧光素酶、三磷酸腺苷二磷酸酶等反应试剂加入到反应容器,经过聚合、硫酸化、氧化即可产生强度与结合的核苷酸数目线性相关的光信号,每个反应容器发出的光就能被探测到.利用这项技术在4.5 h内可测序2000万~3000万碱基对,准确度达到99%或更高,并且无需在细菌体内进行亚克隆.大规模并行焦磷酸测序开启了个体化基因组学的新时代.
在後基因組時代,基因研究的焦點已經轉移到每箇人的基因組,因此迫切需要高通量的測序方法.近幾年,齣現瞭基于焦燐痠的新測序方法--大規模併行焦燐痠測序技術.在這項技術中,雙鏈DNA首先被片段化,每單箇寡覈苷痠鏈分子結閤到磁珠支持物上,用乳液PCR對結閤的片段進行擴增.擴增後的片段-磁珠複閤物被分彆置于光纖芯片上的皮升級反應容器中.然後將DNA聚閤酶、ATP硫痠化酶、熒光素酶、三燐痠腺苷二燐痠酶等反應試劑加入到反應容器,經過聚閤、硫痠化、氧化即可產生彊度與結閤的覈苷痠數目線性相關的光信號,每箇反應容器髮齣的光就能被探測到.利用這項技術在4.5 h內可測序2000萬~3000萬堿基對,準確度達到99%或更高,併且無需在細菌體內進行亞剋隆.大規模併行焦燐痠測序開啟瞭箇體化基因組學的新時代.
재후기인조시대,기인연구적초점이경전이도매개인적기인조,인차박절수요고통량적측서방법.근궤년,출현료기우초린산적신측서방법--대규모병행초린산측서기술.재저항기술중,쌍련DNA수선피편단화,매단개과핵감산련분자결합도자주지지물상,용유액PCR대결합적편단진행확증.확증후적편단-자주복합물피분별치우광섬심편상적피승급반응용기중.연후장DNA취합매、ATP류산화매、형광소매、삼린산선감이린산매등반응시제가입도반응용기,경과취합、류산화、양화즉가산생강도여결합적핵감산수목선성상관적광신호,매개반응용기발출적광취능피탐측도.이용저항기술재4.5 h내가측서2000만~3000만감기대,준학도체도99%혹경고,병차무수재세균체내진행아극륭.대규모병행초린산측서개계료개체화기인조학적신시대.