中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2008年
10期
1206-1209
,共4页
王晨光%苏冠方%齐首楠%刘早霞%赵亮亮
王晨光%囌冠方%齊首楠%劉早霞%趙亮亮
왕신광%소관방%제수남%류조하%조량량
生长相关蛋白-43%骨髓间充质干细胞%诱导%分化%免疫细胞化学
生長相關蛋白-43%骨髓間充質榦細胞%誘導%分化%免疫細胞化學
생장상관단백-43%골수간충질간세포%유도%분화%면역세포화학
目的 观察生长相关蛋白-43(GAP-43)在体外培养的骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经样细胞分化中的表达情况以探讨其在骨髓间充质干细胞定向分化过程中的作用.方法 体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,选取第3代细胞,经流式细胞仪检测细胞表面标志物进行鉴定,并分别应用化学诱导剂β巯基乙醇(BME)和脑源性神经生长因子(BDNF)诱导BMSCs分化,观察诱导后细胞的形态学变化,并应用免疫细胞化学方法对诱导后的细胞进行鉴定、分析生长相关蛋白43、神经巢蛋白(nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF) 的表达情况.应用统计学方法比较两组细胞经诱导后2、4、6、8 h GAP-43免疫细胞化学染色阳性率.结果 第三代BMSCs经流式细胞仪检测CD90(+)、CD71(+)、CD29(+),CD45(-),经两种方法诱导BMSCs均可分化为神经样细胞,分化后细胞均表达GAP-43、nestin、NSE、NF.诱导后2,4,6,8 h GAP-43表达阳性率BME组为77.1%,83.4%,87.0%,82.5%,BDNF组:69.3%,78.1%,82.2%,86.8%.GAP-43随诱导分化时间增加而持续表达,两组间表达阳性率无统计学差异.结论 GAP-43在化学诱导剂及生长因子诱导BMSCs分化为神经样细胞过程中持续表达,对于骨髓间充质干细胞向神经样细胞的分化具有重要意义.
目的 觀察生長相關蛋白-43(GAP-43)在體外培養的骨髓間充質榦細胞(BMSCs)嚮神經樣細胞分化中的錶達情況以探討其在骨髓間充質榦細胞定嚮分化過程中的作用.方法 體外培養大鼠骨髓間充質榦細胞,選取第3代細胞,經流式細胞儀檢測細胞錶麵標誌物進行鑒定,併分彆應用化學誘導劑β巰基乙醇(BME)和腦源性神經生長因子(BDNF)誘導BMSCs分化,觀察誘導後細胞的形態學變化,併應用免疫細胞化學方法對誘導後的細胞進行鑒定、分析生長相關蛋白43、神經巢蛋白(nestin)、神經元特異性烯醇化酶(NSE)、神經絲蛋白(NF) 的錶達情況.應用統計學方法比較兩組細胞經誘導後2、4、6、8 h GAP-43免疫細胞化學染色暘性率.結果 第三代BMSCs經流式細胞儀檢測CD90(+)、CD71(+)、CD29(+),CD45(-),經兩種方法誘導BMSCs均可分化為神經樣細胞,分化後細胞均錶達GAP-43、nestin、NSE、NF.誘導後2,4,6,8 h GAP-43錶達暘性率BME組為77.1%,83.4%,87.0%,82.5%,BDNF組:69.3%,78.1%,82.2%,86.8%.GAP-43隨誘導分化時間增加而持續錶達,兩組間錶達暘性率無統計學差異.結論 GAP-43在化學誘導劑及生長因子誘導BMSCs分化為神經樣細胞過程中持續錶達,對于骨髓間充質榦細胞嚮神經樣細胞的分化具有重要意義.
목적 관찰생장상관단백-43(GAP-43)재체외배양적골수간충질간세포(BMSCs)향신경양세포분화중적표체정황이탐토기재골수간충질간세포정향분화과정중적작용.방법 체외배양대서골수간충질간세포,선취제3대세포,경류식세포의검측세포표면표지물진행감정,병분별응용화학유도제β구기을순(BME)화뇌원성신경생장인자(BDNF)유도BMSCs분화,관찰유도후세포적형태학변화,병응용면역세포화학방법대유도후적세포진행감정、분석생장상관단백43、신경소단백(nestin)、신경원특이성희순화매(NSE)、신경사단백(NF) 적표체정황.응용통계학방법비교량조세포경유도후2、4、6、8 h GAP-43면역세포화학염색양성솔.결과 제삼대BMSCs경류식세포의검측CD90(+)、CD71(+)、CD29(+),CD45(-),경량충방법유도BMSCs균가분화위신경양세포,분화후세포균표체GAP-43、nestin、NSE、NF.유도후2,4,6,8 h GAP-43표체양성솔BME조위77.1%,83.4%,87.0%,82.5%,BDNF조:69.3%,78.1%,82.2%,86.8%.GAP-43수유도분화시간증가이지속표체,량조간표체양성솔무통계학차이.결론 GAP-43재화학유도제급생장인자유도BMSCs분화위신경양세포과정중지속표체,대우골수간충질간세포향신경양세포적분화구유중요의의.