徐州医学院学报
徐州醫學院學報
서주의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE XUZHOU
2008年
1期
30-34
,共5页
韩会峰%许铁%裴冬生%秦宏敏
韓會峰%許鐵%裴鼕生%秦宏敏
한회봉%허철%배동생%진굉민
甲状旁腺相关蛋白(PTHrP)%RNA干扰%基因沉默%软骨肉瘤%细胞凋亡
甲狀徬腺相關蛋白(PTHrP)%RNA榦擾%基因沉默%軟骨肉瘤%細胞凋亡
갑상방선상관단백(PTHrP)%RNA간우%기인침묵%연골육류%세포조망
目的 研究甲状旁腺相关蛋白(parathyroid hormone-related protein,PTHrP)对软骨肉瘤细胞增殖的影响.方法 本实验设置空白对照组、空质粒组和siPTHrP转染组,每组样本数均为6.空白对照组不做处理;分别将空质粒pSilencer3.1 H1 neo(空质粒组)和重组质粒pSilencer3.1H1 neo-siPTHrP(siPTHrP转染组)转染至SW1353软骨肉瘤细胞株,通过MTT法检测各组细胞活力并绘制细胞生长曲线,利用流式细胞技术测定细胞凋亡率,半定量RT-PCR和Western blotting法检测PTHrP基因在mRNA水平及蛋白水平表达上的变化.结果 siPTHrP转染组的细胞生长较空白对照组软骨肉瘤细胞明显缓慢;siPTHrP转染组细胞凋亡率明显升高;重组质粒pSilencer3.1H1 neo-siPTHrP能明显抑制软骨肉瘤细胞的PTHrP基因在mRNA转录水平和蛋白水平上的表达.结论 重组质粒pSilencer3.1H1 neo-siPTHrP可明显抑制软骨肉瘤细胞增殖及其内源基因PTHrP在mRNA转录水平和蛋白水平的表达,为PTHrP介导的软骨肉瘤基因沉默疗法提供了理论基础.
目的 研究甲狀徬腺相關蛋白(parathyroid hormone-related protein,PTHrP)對軟骨肉瘤細胞增殖的影響.方法 本實驗設置空白對照組、空質粒組和siPTHrP轉染組,每組樣本數均為6.空白對照組不做處理;分彆將空質粒pSilencer3.1 H1 neo(空質粒組)和重組質粒pSilencer3.1H1 neo-siPTHrP(siPTHrP轉染組)轉染至SW1353軟骨肉瘤細胞株,通過MTT法檢測各組細胞活力併繪製細胞生長麯線,利用流式細胞技術測定細胞凋亡率,半定量RT-PCR和Western blotting法檢測PTHrP基因在mRNA水平及蛋白水平錶達上的變化.結果 siPTHrP轉染組的細胞生長較空白對照組軟骨肉瘤細胞明顯緩慢;siPTHrP轉染組細胞凋亡率明顯升高;重組質粒pSilencer3.1H1 neo-siPTHrP能明顯抑製軟骨肉瘤細胞的PTHrP基因在mRNA轉錄水平和蛋白水平上的錶達.結論 重組質粒pSilencer3.1H1 neo-siPTHrP可明顯抑製軟骨肉瘤細胞增殖及其內源基因PTHrP在mRNA轉錄水平和蛋白水平的錶達,為PTHrP介導的軟骨肉瘤基因沉默療法提供瞭理論基礎.
목적 연구갑상방선상관단백(parathyroid hormone-related protein,PTHrP)대연골육류세포증식적영향.방법 본실험설치공백대조조、공질립조화siPTHrP전염조,매조양본수균위6.공백대조조불주처리;분별장공질립pSilencer3.1 H1 neo(공질립조)화중조질립pSilencer3.1H1 neo-siPTHrP(siPTHrP전염조)전염지SW1353연골육류세포주,통과MTT법검측각조세포활력병회제세포생장곡선,이용류식세포기술측정세포조망솔,반정량RT-PCR화Western blotting법검측PTHrP기인재mRNA수평급단백수평표체상적변화.결과 siPTHrP전염조적세포생장교공백대조조연골육류세포명현완만;siPTHrP전염조세포조망솔명현승고;중조질립pSilencer3.1H1 neo-siPTHrP능명현억제연골육류세포적PTHrP기인재mRNA전록수평화단백수평상적표체.결론 중조질립pSilencer3.1H1 neo-siPTHrP가명현억제연골육류세포증식급기내원기인PTHrP재mRNA전록수평화단백수평적표체,위PTHrP개도적연골육류기인침묵요법제공료이론기출.
