中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2007年
6期
641-644
,共4页
史艳侠%韩文杰%彭柔君%张景航%黄慧强%姜文奇
史豔俠%韓文傑%彭柔君%張景航%黃慧彊%薑文奇
사염협%한문걸%팽유군%장경항%황혜강%강문기
foxp3%FLAG蛋白%慢病毒载体,CD4+CD25+Treg,RNA干扰
foxp3%FLAG蛋白%慢病毒載體,CD4+CD25+Treg,RNA榦擾
foxp3%FLAG단백%만병독재체,CD4+CD25+Treg,RNA간우
[目的]筛选高效的foxp3 RNA干扰的靶点用于阻断CD4+CD25+Treg细胞的免疫抑制功能.[方法]使用oligoengine软件设计foxp3基因shRNA序列,化学合成法合成4条shRNA序列,构建含foxp3的靶序列的慢病毒载体;构建出表达FLAG融合蛋白和目的基因的工具细胞293T细胞用于筛选RNA干扰的有效靶点.[结果]成功包装了4条foxp3基因靶序列相应的慢病毒颗粒;成功构建了表达融合蛋白和目的基因的293T工具细胞;在工具细胞上筛选出了2条RNAi效率分别为91.3%和95.6%的有效靶点.[结论]使用FLAG融合蛋白和慢病毒载体能够筛选出Foxp3基因的RNAi最佳靶点.
[目的]篩選高效的foxp3 RNA榦擾的靶點用于阻斷CD4+CD25+Treg細胞的免疫抑製功能.[方法]使用oligoengine軟件設計foxp3基因shRNA序列,化學閤成法閤成4條shRNA序列,構建含foxp3的靶序列的慢病毒載體;構建齣錶達FLAG融閤蛋白和目的基因的工具細胞293T細胞用于篩選RNA榦擾的有效靶點.[結果]成功包裝瞭4條foxp3基因靶序列相應的慢病毒顆粒;成功構建瞭錶達融閤蛋白和目的基因的293T工具細胞;在工具細胞上篩選齣瞭2條RNAi效率分彆為91.3%和95.6%的有效靶點.[結論]使用FLAG融閤蛋白和慢病毒載體能夠篩選齣Foxp3基因的RNAi最佳靶點.
[목적]사선고효적foxp3 RNA간우적파점용우조단CD4+CD25+Treg세포적면역억제공능.[방법]사용oligoengine연건설계foxp3기인shRNA서렬,화학합성법합성4조shRNA서렬,구건함foxp3적파서렬적만병독재체;구건출표체FLAG융합단백화목적기인적공구세포293T세포용우사선RNA간우적유효파점.[결과]성공포장료4조foxp3기인파서렬상응적만병독과립;성공구건료표체융합단백화목적기인적293T공구세포;재공구세포상사선출료2조RNAi효솔분별위91.3%화95.6%적유효파점.[결론]사용FLAG융합단백화만병독재체능구사선출Foxp3기인적RNAi최가파점.
