畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2007年
12期
1414-1420
,共7页
马建%郭巍%沈楠%孔宪刚%沈荣显%周建华
馬建%郭巍%瀋楠%孔憲剛%瀋榮顯%週建華
마건%곽외%침남%공헌강%침영현%주건화
马%经典主要组织相容性复合体Ⅰ类分子%多态性%反转录-聚合酶链式反应
馬%經典主要組織相容性複閤體Ⅰ類分子%多態性%反轉錄-聚閤酶鏈式反應
마%경전주요조직상용성복합체Ⅰ류분자%다태성%반전록-취합매련식반응
基于RT-PCR方法,扩增了用于马传染性贫血病毒(Equine infectious anemia virus,EIAV)减毒疫苗株CTL表位研究的5匹马的编码经典MHC-Ⅰ类分子的大部分基因,具体包括编码肽结合区大部分区域、α3区、穿膜区及胞浆区蛋白的基因,并进行了PCR产物的克隆和测序.试验马匹外周血单个核细胞(Peripheral blood mono-nuclear cells,PBMC)的总RNA提取物经RT-PCR扩增,并将所得产物进行T-A克隆.从每匹马的所有克隆中,分别随机挑取鉴定为阳性重组质粒的21～23个克隆用于测序分析.研究结果表明,5匹试验马匹各自具有3～5个等位基因,由于MHC-Ⅰ分子等位基因表达的共显性特征,可以推测马的基因组内可能存在2～3个基因座对应于这些等位基因,这与国外已有研究结论基本一致.另外,不同马匹PBMC表达的MHC-Ⅰ类分子的差别水平不一致.除了6号与7号和10号马之间MHC-Ⅰ类分子的差异较大,无相同或高度相近的经典MHC-Ⅰ类分子序列外,各马匹间均表达具有1个或1个以上的相同或高度同源的对应经典的MHC-Ⅰ类分子的mRNA.以上研究结果既可作为正在开展的EIAV减毒疫苗株CTL表位研究的基础性、支持性数据,又可进一步丰富国内马的经典MHC-Ⅰ分子多态性方面的相关研究.
基于RT-PCR方法,擴增瞭用于馬傳染性貧血病毒(Equine infectious anemia virus,EIAV)減毒疫苗株CTL錶位研究的5匹馬的編碼經典MHC-Ⅰ類分子的大部分基因,具體包括編碼肽結閤區大部分區域、α3區、穿膜區及胞漿區蛋白的基因,併進行瞭PCR產物的剋隆和測序.試驗馬匹外週血單箇覈細胞(Peripheral blood mono-nuclear cells,PBMC)的總RNA提取物經RT-PCR擴增,併將所得產物進行T-A剋隆.從每匹馬的所有剋隆中,分彆隨機挑取鑒定為暘性重組質粒的21～23箇剋隆用于測序分析.研究結果錶明,5匹試驗馬匹各自具有3～5箇等位基因,由于MHC-Ⅰ分子等位基因錶達的共顯性特徵,可以推測馬的基因組內可能存在2～3箇基因座對應于這些等位基因,這與國外已有研究結論基本一緻.另外,不同馬匹PBMC錶達的MHC-Ⅰ類分子的差彆水平不一緻.除瞭6號與7號和10號馬之間MHC-Ⅰ類分子的差異較大,無相同或高度相近的經典MHC-Ⅰ類分子序列外,各馬匹間均錶達具有1箇或1箇以上的相同或高度同源的對應經典的MHC-Ⅰ類分子的mRNA.以上研究結果既可作為正在開展的EIAV減毒疫苗株CTL錶位研究的基礎性、支持性數據,又可進一步豐富國內馬的經典MHC-Ⅰ分子多態性方麵的相關研究.
기우RT-PCR방법,확증료용우마전염성빈혈병독(Equine infectious anemia virus,EIAV)감독역묘주CTL표위연구적5필마적편마경전MHC-Ⅰ류분자적대부분기인,구체포괄편마태결합구대부분구역、α3구、천막구급포장구단백적기인,병진행료PCR산물적극륭화측서.시험마필외주혈단개핵세포(Peripheral blood mono-nuclear cells,PBMC)적총RNA제취물경RT-PCR확증,병장소득산물진행T-A극륭.종매필마적소유극륭중,분별수궤도취감정위양성중조질립적21～23개극륭용우측서분석.연구결과표명,5필시험마필각자구유3～5개등위기인,유우MHC-Ⅰ분자등위기인표체적공현성특정,가이추측마적기인조내가능존재2～3개기인좌대응우저사등위기인,저여국외이유연구결론기본일치.령외,불동마필PBMC표체적MHC-Ⅰ류분자적차별수평불일치.제료6호여7호화10호마지간MHC-Ⅰ류분자적차이교대,무상동혹고도상근적경전MHC-Ⅰ류분자서렬외,각마필간균표체구유1개혹1개이상적상동혹고도동원적대응경전적MHC-Ⅰ류분자적mRNA.이상연구결과기가작위정재개전적EIAV감독역묘주CTL표위연구적기출성、지지성수거,우가진일보봉부국내마적경전MHC-Ⅰ분자다태성방면적상관연구.
