CAJ | 학술논문

目的:观察重组人促红细胞生成素对缺氧缺血性脑损伤新生鼠海马CA1区半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的影响及对学习、记忆能力的保护作用.方法:实验于2002/2003在南京医科大学儿科医学研究所完成.选用7 d龄SD大鼠62只,随机分为缺氧缺血模型组(n=22),重组人促红细胞生成素治疗组(n=20)和假手术组(n=20).缺氧缺血模型组和治疗组结扎左侧颈总动脉,并吸入体积分数0.08的O2.假手术组不结扎颈总动脉,不缺氧.①缺氧缺血模型组和假手术组缺氧前腹腔注射生理盐水,治疗组腹腔注射生理盐水稀释的重组人红细胞生成素(500U/mL),剂量均为0.01 mmL/g.观察模型组和治疗组大鼠在缺氧过程中的躁动和抽搐情况;记录缺氧后0,6,12,24 h时间点两组大鼠发生抽搐情况(自发左旋、夹尾左旋及夹尾尖叫)只数.②缺氧24h后随机取缺氧缺血模型组9只,治疗组10只,假手术组9只,取脑组织,在海马及小脑部位进行冠状切片,免疫组织化学法检测各组海马CA1区活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达.③取缺氧缺血模型组,治疗组和假手术组各10只,模型组与假手术组再行腹腔注射生理盐水,治疗组注射重组人红细胞生成素,剂量均为0.01 mL/g,48 h各组再注射一次.利用跳台实验观察各组大鼠生后75 d学习、记忆潜伏期和错误次数.结果:模型组动物在缺氧缺血模型制作过程中死亡3只,治疗组及假手术组动物无死亡,均进入结果分析.①行为学结果:治疗组缺氧后24 h自发左旋、夹尾左旋、夹尾尖叫的发生率与模型组比较明显降低大鼠[(16.7%、50%、50%),(66.7%、83.3%、91.7%),P＜0.05].②缺氧缺血后大鼠脑组织内活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞明显增多,在海马、大脑皮质分布较为密集.模型组、治疗组、假手术组海马CA1区单位面积内阳性细胞数差异有显著性意义[(41.38±2.09),(22.63±3.17),(10.52±2.70)个/mm2,F=296.20,P＜0.01].模型组明显高于假手术组,治疗组较模型组明显减少,但仍高于假手术组,差异非常显著(q=21.28,P＜0.01).③跳台试验:模型组学习潜伏期与假手术组相比明显延长;错误次数明显增多;记忆潜伏期明显缩短;错误次数显著增加.而治疗组较模型组学习、记忆能力明显改善,表现为学习潜伏期明显缩短;错误次数明显减少;记忆潜伏期明显延长;错误次数显著减少.结论:缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性显著增高,重组人红细胞生成素能抑制半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3激活,减轻对新生鼠缺氧缺血的脑损伤,改善动物学习、记忆能力. 目的:觀察重組人促紅細胞生成素對缺氧缺血性腦損傷新生鼠海馬CA1區半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶3的影響及對學習、記憶能力的保護作用.方法:實驗于2002/2003在南京醫科大學兒科醫學研究所完成.選用7 d齡SD大鼠62隻,隨機分為缺氧缺血模型組(n=22),重組人促紅細胞生成素治療組(n=20)和假手術組(n=20).缺氧缺血模型組和治療組結扎左側頸總動脈,併吸入體積分數0.08的O2.假手術組不結扎頸總動脈,不缺氧.①缺氧缺血模型組和假手術組缺氧前腹腔註射生理鹽水,治療組腹腔註射生理鹽水稀釋的重組人紅細胞生成素(500U/mL),劑量均為0.01 mmL/g.觀察模型組和治療組大鼠在缺氧過程中的躁動和抽搐情況;記錄缺氧後0,6,12,24 h時間點兩組大鼠髮生抽搐情況(自髮左鏇、夾尾左鏇及夾尾尖叫)隻數.②缺氧24h後隨機取缺氧缺血模型組9隻,治療組10隻,假手術組9隻,取腦組織,在海馬及小腦部位進行冠狀切片,免疫組織化學法檢測各組海馬CA1區活化的半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶3的錶達.③取缺氧缺血模型組,治療組和假手術組各10隻,模型組與假手術組再行腹腔註射生理鹽水,治療組註射重組人紅細胞生成素,劑量均為0.01 mL/g,48 h各組再註射一次.利用跳檯實驗觀察各組大鼠生後75 d學習、記憶潛伏期和錯誤次數.結果:模型組動物在缺氧缺血模型製作過程中死亡3隻,治療組及假手術組動物無死亡,均進入結果分析.①行為學結果:治療組缺氧後24 h自髮左鏇、夾尾左鏇、夾尾尖叫的髮生率與模型組比較明顯降低大鼠[(16.7%、50%、50%),(66.7%、83.3%、91.7%),P＜0.05].②缺氧缺血後大鼠腦組織內活化半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶3暘性細胞明顯增多,在海馬、大腦皮質分佈較為密集.模型組、治療組、假手術組海馬CA1區單位麵積內暘性細胞數差異有顯著性意義[(41.38±2.09),(22.63±3.17),(10.52±2.70)箇/mm2,F=296.20,P＜0.01].模型組明顯高于假手術組,治療組較模型組明顯減少,但仍高于假手術組,差異非常顯著(q=21.28,P＜0.01).③跳檯試驗:模型組學習潛伏期與假手術組相比明顯延長;錯誤次數明顯增多;記憶潛伏期明顯縮短;錯誤次數顯著增加.而治療組較模型組學習、記憶能力明顯改善,錶現為學習潛伏期明顯縮短;錯誤次數明顯減少;記憶潛伏期明顯延長;錯誤次數顯著減少.結論:缺氧缺血性腦損傷新生大鼠海馬半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶3活性顯著增高,重組人紅細胞生成素能抑製半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶3激活,減輕對新生鼠缺氧缺血的腦損傷,改善動物學習、記憶能力.
목적:관찰중조인촉홍세포생성소대결양결혈성뇌손상신생서해마CA1구반광안산천동안산단백매3적영향급대학습、기억능력적보호작용.방법:실험우2002/2003재남경의과대학인과의학연구소완성.선용7 d령SD대서62지,수궤분위결양결혈모형조(n=22),중조인촉홍세포생성소치료조(n=20)화가수술조(n=20).결양결혈모형조화치료조결찰좌측경총동맥,병흡입체적분수0.08적O2.가수술조불결찰경총동맥,불결양.①결양결혈모형조화가수술조결양전복강주사생리염수,치료조복강주사생리염수희석적중조인홍세포생성소(500U/mL),제량균위0.01 mmL/g.관찰모형조화치료조대서재결양과정중적조동화추휵정황;기록결양후0,6,12,24 h시간점량조대서발생추휵정황(자발좌선、협미좌선급협미첨규)지수.②결양24h후수궤취결양결혈모형조9지,치료조10지,가수술조9지,취뇌조직,재해마급소뇌부위진행관상절편,면역조직화학법검측각조해마CA1구활화적반광안산천동안산단백매3적표체.③취결양결혈모형조,치료조화가수술조각10지,모형조여가수술조재행복강주사생리염수,치료조주사중조인홍세포생성소,제량균위0.01 mL/g,48 h각조재주사일차.이용도태실험관찰각조대서생후75 d학습、기억잠복기화착오차수.결과:모형조동물재결양결혈모형제작과정중사망3지,치료조급가수술조동물무사망,균진입결과분석.①행위학결과:치료조결양후24 h자발좌선、협미좌선、협미첨규적발생솔여모형조비교명현강저대서[(16.7%、50%、50%),(66.7%、83.3%、91.7%),P＜0.05].②결양결혈후대서뇌조직내활화반광안산천동안산단백매3양성세포명현증다,재해마、대뇌피질분포교위밀집.모형조、치료조、가수술조해마CA1구단위면적내양성세포수차이유현저성의의[(41.38±2.09),(22.63±3.17),(10.52±2.70)개/mm2,F=296.20,P＜0.01].모형조명현고우가수술조,치료조교모형조명현감소,단잉고우가수술조,차이비상현저(q=21.28,P＜0.01).③도태시험:모형조학습잠복기여가수술조상비명현연장;착오차수명현증다;기억잠복기명현축단;착오차수현저증가.이치료조교모형조학습、기억능력명현개선,표현위학습잠복기명현축단;착오차수명현감소;기억잠복기명현연장;착오차수현저감소.결론:결양결혈성뇌손상신생대서해마반광안산천동안산단백매3활성현저증고,중조인홍세포생성소능억제반광안산천동안산단백매3격활,감경대신생서결양결혈적뇌손상,개선동물학습、기억능력.