CAJ | 학술논문

背景与目的:p55PIK是磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的调节亚单位之一.p55PIK依赖于其N末端独特的24个氨基酸结合Rb,这24个氨基酸的表达能抑制细胞周期的进程.本研究目的在于观察p55PIK N末端24个氨基酸的表达对胃癌细胞增殖和生长的影响,并初步探讨其可能的作用机制.方法:通过Lipofectamine介导,用pEGFP-N24表达质粒转染MGC803细胞,用Western blot鉴定融合蛋白GFP-N24在MGC803细胞中的瞬时表达;MTT法检测转染细胞的生长情况;克隆形成实验观察N24p55PIK过表达对细胞克隆形成能力的影响;动物实验观察表达N24p55PIK的细胞在裸鼠体内的成瘤能力;Western blot法分析N24p55PIK表达对细胞周期蛋白Cyclin D1表达的影响.结果:N24p55PIK在MGC803细胞中能够有效表达,但其表达量明显低于对照组.与对照组细胞相比,N24p55PIK的表达使细胞生长速度减慢,细胞倍增时间明显延长;表达N24p55PIK的细胞在克隆形成的数量上与对照组相比差异无显著性,但在克隆体积上明显小于对照组.表达N24p55PIK的MGC803细胞在裸鼠中的成瘤能力有所下降,其所形成肿瘤的重量和体积分别为(0.398±0.244)g和(408±268)mm3,而空载体对照组分别为(0.763±0.193)g和(829±271)mm3,两组相比差异有显著性(P＜0.05).N24p55PIK在MGC803细胞中的表达抑制Cyclin D1的表达.结论:p55PIK调节亚单位N末端24个氨基酸的表达在体外和体内均能抑制肿瘤细胞的生长;减少Cyclin D1的表达可能是其发挥作用的主要机制;来源于PI3K调节亚单位p55PIK的N24肽在肿瘤的治疗上可能具有潜在的应用前景.
배경여목적:p55PIK시린지선기순3-격매(PI3K)적조절아단위지일.p55PIK의뢰우기N말단독특적24개안기산결합Rb,저24개안기산적표체능억제세포주기적진정.본연구목적재우관찰p55PIK N말단24개안기산적표체대위암세포증식화생장적영향,병초보탐토기가능적작용궤제.방법:통과Lipofectamine개도,용pEGFP-N24표체질립전염MGC803세포,용Western blot감정융합단백GFP-N24재MGC803세포중적순시표체;MTT법검측전염세포적생장정황;극륭형성실험관찰N24p55PIK과표체대세포극륭형성능력적영향;동물실험관찰표체N24p55PIK적세포재라서체내적성류능력;Western blot법분석N24p55PIK표체대세포주기단백Cyclin D1표체적영향.결과:N24p55PIK재MGC803세포중능구유효표체,단기표체량명현저우대조조.여대조조세포상비,N24p55PIK적표체사세포생장속도감만,세포배증시간명현연장;표체N24p55PIK적세포재극륭형성적수량상여대조조상비차이무현저성,단재극륭체적상명현소우대조조.표체N24p55PIK적MGC803세포재라서중적성류능력유소하강,기소형성종류적중량화체적분별위(0.398±0.244)g화(408±268)mm3,이공재체대조조분별위(0.763±0.193)g화(829±271)mm3,량조상비차이유현저성(P＜0.05).N24p55PIK재MGC803세포중적표체억제Cyclin D1적표체.결론:p55PIK조절아단위N말단24개안기산적표체재체외화체내균능억제종류세포적생장;감소Cyclin D1적표체가능시기발휘작용적주요궤제;래원우PI3K조절아단위p55PIK적N24태재종류적치료상가능구유잠재적응용전경.