中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2006年
3期
259-261
,共3页
刘大维%刘景晔%王鹏富%姜春来%于湘晖%孔维
劉大維%劉景曄%王鵬富%薑春來%于湘暉%孔維
류대유%류경엽%왕붕부%강춘래%우상휘%공유
人乳头瘤病毒%晚期蛋白%真核表达质粒%Cos-7细胞
人乳頭瘤病毒%晚期蛋白%真覈錶達質粒%Cos-7細胞
인유두류병독%만기단백%진핵표체질립%Cos-7세포
目的克隆宫颈癌病理组织中人乳头瘤病毒16型(HPV16)晚期蛋白(L1)的基因,并构建真核表达质粒,为制备预防性疫苗奠定基础.方法采用PCR法从宫颈癌病理标本中扩增出HPV16 L1基因,与pMD18-T载体连接,测序并构建真核表达质粒(pVAX1-L1),瞬时转染Cos-7细胞,利用免疫组化技术检测表达产物.通过小鼠淋巴细胞转化试验检测免疫原性.结果所得L1基因的序列与GenBank中序列比较存在若干变异,并由此引起相应的氨基酸发生变化.pVAX1-L1瞬时转染Cos-7细胞,经免疫组化技术检测到棕黄色免疫复合物的形成,说明有表达产物L1蛋白产生.淋巴细胞转化试验结果显示,试验组与对照组差异有显著意义.结论宫颈癌病理组织中HPV16 L1基因序列存在一定程度的变异,所得L1基因表达产物具有生物学活性.
目的剋隆宮頸癌病理組織中人乳頭瘤病毒16型(HPV16)晚期蛋白(L1)的基因,併構建真覈錶達質粒,為製備預防性疫苗奠定基礎.方法採用PCR法從宮頸癌病理標本中擴增齣HPV16 L1基因,與pMD18-T載體連接,測序併構建真覈錶達質粒(pVAX1-L1),瞬時轉染Cos-7細胞,利用免疫組化技術檢測錶達產物.通過小鼠淋巴細胞轉化試驗檢測免疫原性.結果所得L1基因的序列與GenBank中序列比較存在若榦變異,併由此引起相應的氨基痠髮生變化.pVAX1-L1瞬時轉染Cos-7細胞,經免疫組化技術檢測到棕黃色免疫複閤物的形成,說明有錶達產物L1蛋白產生.淋巴細胞轉化試驗結果顯示,試驗組與對照組差異有顯著意義.結論宮頸癌病理組織中HPV16 L1基因序列存在一定程度的變異,所得L1基因錶達產物具有生物學活性.
목적극륭궁경암병리조직중인유두류병독16형(HPV16)만기단백(L1)적기인,병구건진핵표체질립,위제비예방성역묘전정기출.방법채용PCR법종궁경암병리표본중확증출HPV16 L1기인,여pMD18-T재체련접,측서병구건진핵표체질립(pVAX1-L1),순시전염Cos-7세포,이용면역조화기술검측표체산물.통과소서림파세포전화시험검측면역원성.결과소득L1기인적서렬여GenBank중서렬비교존재약간변이,병유차인기상응적안기산발생변화.pVAX1-L1순시전염Cos-7세포,경면역조화기술검측도종황색면역복합물적형성,설명유표체산물L1단백산생.림파세포전화시험결과현시,시험조여대조조차이유현저의의.결론궁경암병리조직중HPV16 L1기인서렬존재일정정도적변이,소득L1기인표체산물구유생물학활성.
