细胞生物学杂志
細胞生物學雜誌
세포생물학잡지
CHINESE JOURNAL OF CELL BIOLOGY
2006年
1期
66-70
,共5页
刘丽荣%卢步峰%吕子卿%卢波%张小蕾%郭礼和
劉麗榮%盧步峰%呂子卿%盧波%張小蕾%郭禮和
류려영%로보봉%려자경%로파%장소뢰%곽례화
同源重组%酵母人工染色体%左右臂%多基因修饰
同源重組%酵母人工染色體%左右臂%多基因脩飾
동원중조%효모인공염색체%좌우비%다기인수식
构建携带哺乳动物细胞筛选基因和酵母人工染色体(YAC)同源序列的载体,利用酵母中能够发生高频率同源重组的特点对YAC分别进行左、右臂修饰,依次将NEO、EGFP及PURO基因定点整合到YAC左右臂上.用营养缺陷筛选的方法排除酵母发生突变或随机整合等情况后,用PCR及Southern杂交方法证实各筛选基因定点整合于YAC两臂上,从而获得携带3个哺乳动物细胞筛选基因的YAC克隆.并且由此建立了通过同源重组将哺乳动物标记基因定点引入YAC左右臂的多基因修饰平台.
構建攜帶哺乳動物細胞篩選基因和酵母人工染色體(YAC)同源序列的載體,利用酵母中能夠髮生高頻率同源重組的特點對YAC分彆進行左、右臂脩飾,依次將NEO、EGFP及PURO基因定點整閤到YAC左右臂上.用營養缺陷篩選的方法排除酵母髮生突變或隨機整閤等情況後,用PCR及Southern雜交方法證實各篩選基因定點整閤于YAC兩臂上,從而穫得攜帶3箇哺乳動物細胞篩選基因的YAC剋隆.併且由此建立瞭通過同源重組將哺乳動物標記基因定點引入YAC左右臂的多基因脩飾平檯.
구건휴대포유동물세포사선기인화효모인공염색체(YAC)동원서렬적재체,이용효모중능구발생고빈솔동원중조적특점대YAC분별진행좌、우비수식,의차장NEO、EGFP급PURO기인정점정합도YAC좌우비상.용영양결함사선적방법배제효모발생돌변혹수궤정합등정황후,용PCR급Southern잡교방법증실각사선기인정점정합우YAC량비상,종이획득휴대3개포유동물세포사선기인적YAC극륭.병차유차건립료통과동원중조장포유동물표기기인정점인입YAC좌우비적다기인수식평태.
