CAJ | 학술논문

采用Tris-HCl缓冲液(50mmol/L, pH7.5)抽提、Q-sepharose F.F.阴离子交换层析、Sephacryl S-300凝胶过滤层析、SDS-PAGE等方法,进行中华管鞭虾虾头蛋白酶的分离纯化、酶学性质及其动力学特性的研究.结果表明,中华管鞭虾虾头蛋白酶粗提物经层析后,得到聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的一酶组分.该蛋白酶的比活力从359.39U/mg增加到8277.83U/mg,提高了23.03倍,回收率达37.69%,SDS-PAGE显示该蛋白酶只含一条谱带,相对分子量为24.50kDa.以偶氮酪蛋白作为底物,该酶的米氏常数Km值为0.28mg/ml,最适温度为55℃,最适pH为7.5;蛋白酶在60℃以下比较稳定,放置1h后活性仍保持在60%以上,而在60℃以上时蛋白酶活性急剧下降,80℃放置1h后,酶活性只残留21.32%.10mmol/L Cu2 +、Zn2 +和EDTA对该蛋白酶有较强的抑制作用,抑制率分别约为97%、96%和55%,10mmol/L Mg2 +能显著促进蛋白酶活性,而10mmol/L Fe2 +、Ba2 +、Ca2 +对蛋白酶活性的影响不大.推测中华管鞭虾蛋白酶可能为一种金属蛋白酶.
채용Tris-HCl완충액(50mmol/L, pH7.5)추제、Q-sepharose F.F.음리자교환층석、Sephacryl S-300응효과려층석、SDS-PAGE등방법,진행중화관편하하두단백매적분리순화、매학성질급기동역학특성적연구.결과표명,중화관편하하두단백매조제물경층석후,득도취병희선알응효전영순적일매조분.해단백매적비활력종359.39U/mg증가도8277.83U/mg,제고료23.03배,회수솔체37.69%,SDS-PAGE현시해단백매지함일조보대,상대분자량위24.50kDa.이우담락단백작위저물,해매적미씨상수Km치위0.28mg/ml,최괄온도위55℃,최괄pH위7.5;단백매재60℃이하비교은정,방치1h후활성잉보지재60%이상,이재60℃이상시단백매활성급극하강,80℃방치1h후,매활성지잔류21.32%.10mmol/L Cu2 +、Zn2 +화EDTA대해단백매유교강적억제작용,억제솔분별약위97%、96%화55%,10mmol/L Mg2 +능현저촉진단백매활성,이10mmol/L Fe2 +、Ba2 +、Ca2 +대단백매활성적영향불대.추측중화관편하단백매가능위일충금속단백매.