药学学报
藥學學報
약학학보
ACTA PHARMACEUTICA SINICA
2005年
9期
792-795
,共4页
张天泰%黄镇太%戴瑛%刘艾林%朱平%杜冠华
張天泰%黃鎮太%戴瑛%劉艾林%硃平%杜冠華
장천태%황진태%대영%류애림%주평%두관화
极化荧光%高通量筛选%氧化型低密度脂蛋白受体-1%动脉粥样硬化
極化熒光%高通量篩選%氧化型低密度脂蛋白受體-1%動脈粥樣硬化
겁화형광%고통량사선%양화형저밀도지단백수체-1%동맥죽양경화
目的建立以极化荧光为检测方法的高通量筛选技术,通过大规模筛选发现氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)的天然配体.方法密度梯度超速离心获得正常人血中低密度脂蛋白(LDL),然后用CuSO4(5 μmol·L-1)修饰为氧化型低密度脂蛋白(oxLDL).FITC标记hLOX-1,以受体(LOX-1)和配体(oxLDL)的相互作用为基础建立筛选模型,用极化荧光检测方法,在激发光485 nm、发射光525 nm,对3 200个样品进行高通量筛选,并用Z′因子值评价实验.结果 Z′因子值为0.75,根据建立的基于极化荧光的高通量筛选实验方法,发现3个化合物与hLOX-1有较高的结合活性,IC50值小于31.6 μmol·L-1.结论极化荧光检测方法适合于高通量筛选技术,具有较高的稳定性、灵敏性和可重复性.
目的建立以極化熒光為檢測方法的高通量篩選技術,通過大規模篩選髮現氧化型低密度脂蛋白受體-1(LOX-1)的天然配體.方法密度梯度超速離心穫得正常人血中低密度脂蛋白(LDL),然後用CuSO4(5 μmol·L-1)脩飾為氧化型低密度脂蛋白(oxLDL).FITC標記hLOX-1,以受體(LOX-1)和配體(oxLDL)的相互作用為基礎建立篩選模型,用極化熒光檢測方法,在激髮光485 nm、髮射光525 nm,對3 200箇樣品進行高通量篩選,併用Z′因子值評價實驗.結果 Z′因子值為0.75,根據建立的基于極化熒光的高通量篩選實驗方法,髮現3箇化閤物與hLOX-1有較高的結閤活性,IC50值小于31.6 μmol·L-1.結論極化熒光檢測方法適閤于高通量篩選技術,具有較高的穩定性、靈敏性和可重複性.
목적건립이겁화형광위검측방법적고통량사선기술,통과대규모사선발현양화형저밀도지단백수체-1(LOX-1)적천연배체.방법밀도제도초속리심획득정상인혈중저밀도지단백(LDL),연후용CuSO4(5 μmol·L-1)수식위양화형저밀도지단백(oxLDL).FITC표기hLOX-1,이수체(LOX-1)화배체(oxLDL)적상호작용위기출건립사선모형,용겁화형광검측방법,재격발광485 nm、발사광525 nm,대3 200개양품진행고통량사선,병용Z′인자치평개실험.결과 Z′인자치위0.75,근거건립적기우겁화형광적고통량사선실험방법,발현3개화합물여hLOX-1유교고적결합활성,IC50치소우31.6 μmol·L-1.결론겁화형광검측방법괄합우고통량사선기술,구유교고적은정성、령민성화가중복성.
