CAJ | 학술논문

为获得表达乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的人参细胞系,构建携带HBsAg基因的植物细胞表达载体pBIBSa,采用以农杆菌LBA4404感染的方法,经G418筛选后得到13株具有抗性的人参细胞.提取基因组DNA进行PCR反应,其中8株得到约700bp的HBsAg基因片段;提取mRNA进行RT-PCR反应,其中6株得到约700bp的HBsAg基因片段;用ELISA方法检测HBsAg,6株均为阳性.每克人参细胞中最高含HBsAg184 ng,占细胞可溶性蛋白的0.009%.免疫组化切片染色显示HBsAg主要分布在细胞膜上,少量位于细胞核中.这些结果表明人参细胞整合了HBsAg基因,并能稳定表达HBsAg.
위획득표체을간병독표면항원(HBsAg)적인삼세포계,구건휴대HBsAg기인적식물세포표체재체pBIBSa,채용이농간균LBA4404감염적방법,경G418사선후득도13주구유항성적인삼세포.제취기인조DNA진행PCR반응,기중8주득도약700bp적HBsAg기인편단;제취mRNA진행RT-PCR반응,기중6주득도약700bp적HBsAg기인편단;용ELISA방법검측HBsAg,6주균위양성.매극인삼세포중최고함HBsAg184 ng,점세포가용성단백적0.009%.면역조화절편염색현시HBsAg주요분포재세포막상,소량위우세포핵중.저사결과표명인삼세포정합료HBsAg기인,병능은정표체HBsAg.