CAJ | 학술논문

为了消除造血细胞静态培养中存在的浓度梯度和搅拌悬浮培养时换液引起的波动,为造血细胞体外扩增提供更理想的培养环境和操作方式,利用自主开发的造血细胞重力沉降截留系统结合有溶氧和pH控制的生物反应器进行了脐血造血细胞的灌注培养.两次灌注培养中总细胞分别扩增11.5和18.6倍,扩增倍数最大时,CFU-Mix分别扩增23.2倍和20.4倍、CFU-GM扩增13.9倍和21.5倍、BFU-E扩增8.0倍和6.9倍、CD34+细胞扩增17.1倍和15.4倍.培养到12d时,第一次实验由267×106单个核细胞扩增得到1082×106个总细胞,6.31×106个CFU-GM,6.2×106个CFU-Mix和23×106个CD34+细胞;第二次实验由180 × 106单个核细胞扩增得到1080×106个总细胞,4.65×106个CFU-GM,11.0×106个CFU-Mix和25.0×106个CD34+细胞,这达到了临床规模,由于控制了较低的溶氧和稳定的培养环境,细胞中干/祖细胞含量显著高于方瓶.但灌注培养到后期细胞密度达到较高后,细胞生长受到抑制,这应该是由细胞密度过高本身所引起.搅拌式反应器中进行灌注培养有利于造血干/祖细胞的进一步扩增,培养得到的细胞中干/祖细胞含量较高,培养规模达到了临床要求,但过高的细胞密度将对造血细胞的生长产生抑制.
위료소제조혈세포정태배양중존재적농도제도화교반현부배양시환액인기적파동,위조혈세포체외확증제공경이상적배양배경화조작방식,이용자주개발적조혈세포중력침강절류계통결합유용양화pH공제적생물반응기진행료제혈조혈세포적관주배양.량차관주배양중총세포분별확증11.5화18.6배,확증배수최대시,CFU-Mix분별확증23.2배화20.4배、CFU-GM확증13.9배화21.5배、BFU-E확증8.0배화6.9배、CD34+세포확증17.1배화15.4배.배양도12d시,제일차실험유267×106단개핵세포확증득도1082×106개총세포,6.31×106개CFU-GM,6.2×106개CFU-Mix화23×106개CD34+세포;제이차실험유180 × 106단개핵세포확증득도1080×106개총세포,4.65×106개CFU-GM,11.0×106개CFU-Mix화25.0×106개CD34+세포,저체도료림상규모,유우공제료교저적용양화은정적배양배경,세포중간/조세포함량현저고우방병.단관주배양도후기세포밀도체도교고후,세포생장수도억제,저응해시유세포밀도과고본신소인기.교반식반응기중진행관주배양유리우조혈간/조세포적진일보확증,배양득도적세포중간/조세포함량교고,배양규모체도료림상요구,단과고적세포밀도장대조혈세포적생장산생억제.