中山大学学报(自然科学版)
中山大學學報(自然科學版)
중산대학학보(자연과학판)
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS SUNYATSENI
2004年
5期
73-75
,共3页
李瑞芳%罗进贤%张添元%贺国安%吴江雪%官文俊
李瑞芳%囉進賢%張添元%賀國安%吳江雪%官文俊
리서방%라진현%장첨원%하국안%오강설%관문준
嗜铬粒蛋白N区%基因表达%枯草杆菌%微转座子%抗真菌活性
嗜鉻粒蛋白N區%基因錶達%枯草桿菌%微轉座子%抗真菌活性
기락립단백N구%기인표체%고초간균%미전좌자%항진균활성
为实现CGA1-76片段基因在枯草杆菌中的稳定表达,将CGA1-76片段基因的表达元件重组到枯草杆菌转座子质粒pHV1249微转座子mini-Tn10内,利用mini-Tn10将CGA1-76片段基因的表达元件整合到枯草杆菌DB1342染色体上,用氯霉素和红霉素筛选枯草杆菌转座工程菌DB1342(TnSVTQ).DB1342(TnSVTQ)在无选择压力条件下经10 d连续传代培养,转座子内氯霉素抗性丢失率为0%,说明转座子稳定整合在DB1342染色体上.SDS-PAGE和免疫印迹分析结果表明,在蔗糖诱导下,CGA1-76片段基因在DB1342(TnSVTQ)中获得表达,产物被分泌到细胞外.孔穴琼脂扩散法测定表达上清的抑制真菌活性,结果表明重组CGA1-76能抑制烟曲霉菌和黄曲霉菌的生长,抑菌圈直径分别为9 mm和8 mm.
為實現CGA1-76片段基因在枯草桿菌中的穩定錶達,將CGA1-76片段基因的錶達元件重組到枯草桿菌轉座子質粒pHV1249微轉座子mini-Tn10內,利用mini-Tn10將CGA1-76片段基因的錶達元件整閤到枯草桿菌DB1342染色體上,用氯黴素和紅黴素篩選枯草桿菌轉座工程菌DB1342(TnSVTQ).DB1342(TnSVTQ)在無選擇壓力條件下經10 d連續傳代培養,轉座子內氯黴素抗性丟失率為0%,說明轉座子穩定整閤在DB1342染色體上.SDS-PAGE和免疫印跡分析結果錶明,在蔗糖誘導下,CGA1-76片段基因在DB1342(TnSVTQ)中穫得錶達,產物被分泌到細胞外.孔穴瓊脂擴散法測定錶達上清的抑製真菌活性,結果錶明重組CGA1-76能抑製煙麯黴菌和黃麯黴菌的生長,抑菌圈直徑分彆為9 mm和8 mm.
위실현CGA1-76편단기인재고초간균중적은정표체,장CGA1-76편단기인적표체원건중조도고초간균전좌자질립pHV1249미전좌자mini-Tn10내,이용mini-Tn10장CGA1-76편단기인적표체원건정합도고초간균DB1342염색체상,용록매소화홍매소사선고초간균전좌공정균DB1342(TnSVTQ).DB1342(TnSVTQ)재무선택압력조건하경10 d련속전대배양,전좌자내록매소항성주실솔위0%,설명전좌자은정정합재DB1342염색체상.SDS-PAGE화면역인적분석결과표명,재자당유도하,CGA1-76편단기인재DB1342(TnSVTQ)중획득표체,산물피분비도세포외.공혈경지확산법측정표체상청적억제진균활성,결과표명중조CGA1-76능억제연곡매균화황곡매균적생장,억균권직경분별위9 mm화8 mm.
