中国兽药杂志
中國獸藥雜誌
중국수약잡지
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY DRUG
2003年
6期
8-10
,共3页
刘守仁%王新华%钟发刚%沈敏%杨华%连宏军%薄新文
劉守仁%王新華%鐘髮剛%瀋敏%楊華%連宏軍%薄新文
류수인%왕신화%종발강%침민%양화%련굉군%박신문
绵羊%脑垂体%生长激素%基因克隆
綿羊%腦垂體%生長激素%基因剋隆
면양%뇌수체%생장격소%기인극륭
本文旨在新疆绵羊生长激素(oGH)基因的克隆.从阿勒泰×中国美利奴杂交羊脑垂体细胞中提取总RNA,分离得到具翻译活性的mRNA.用RT-PCR方法扩增出编码oGH的基因,长度为671 bp.将扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后,回收纯化.采用PCR克隆试剂盒将扩增产物连接至pT-Adv质粒上,经Pst I和Xba I双酶切鉴定正反插入后,筛选正向插入阳性克隆,并进行序列分析.结果表明克隆到的oGH基因序列与国外报道的序列有4个碱基差异,但所推导的氨基酸序列完全一致.oGH基因的开放阅读框架共含654个核苷酸,编码217个氨基酸,其中信号肽26个氨基酸,编码碱基为1～78(78 bp);成熟肽191个氨基酸,编码碱基为79～651(573 bp);终止密码子TAG(652～654 bp).其蛋白质的氨基酸序列与牛、人和鱼的序列同源性分别为99.08%、26.7%和5.9%.
本文旨在新疆綿羊生長激素(oGH)基因的剋隆.從阿勒泰×中國美利奴雜交羊腦垂體細胞中提取總RNA,分離得到具翻譯活性的mRNA.用RT-PCR方法擴增齣編碼oGH的基因,長度為671 bp.將擴增產物經瓊脂糖凝膠電泳後,迴收純化.採用PCR剋隆試劑盒將擴增產物連接至pT-Adv質粒上,經Pst I和Xba I雙酶切鑒定正反插入後,篩選正嚮插入暘性剋隆,併進行序列分析.結果錶明剋隆到的oGH基因序列與國外報道的序列有4箇堿基差異,但所推導的氨基痠序列完全一緻.oGH基因的開放閱讀框架共含654箇覈苷痠,編碼217箇氨基痠,其中信號肽26箇氨基痠,編碼堿基為1～78(78 bp);成熟肽191箇氨基痠,編碼堿基為79～651(573 bp);終止密碼子TAG(652～654 bp).其蛋白質的氨基痠序列與牛、人和魚的序列同源性分彆為99.08%、26.7%和5.9%.
본문지재신강면양생장격소(oGH)기인적극륭.종아륵태×중국미리노잡교양뇌수체세포중제취총RNA,분리득도구번역활성적mRNA.용RT-PCR방법확증출편마oGH적기인,장도위671 bp.장확증산물경경지당응효전영후,회수순화.채용PCR극륭시제합장확증산물련접지pT-Adv질립상,경Pst I화Xba I쌍매절감정정반삽입후,사선정향삽입양성극륭,병진행서렬분석.결과표명극륭도적oGH기인서렬여국외보도적서렬유4개감기차이,단소추도적안기산서렬완전일치.oGH기인적개방열독광가공함654개핵감산,편마217개안기산,기중신호태26개안기산,편마감기위1～78(78 bp);성숙태191개안기산,편마감기위79～651(573 bp);종지밀마자TAG(652～654 bp).기단백질적안기산서렬여우、인화어적서렬동원성분별위99.08%、26.7%화5.9%.
