河北医科大学学报
河北醫科大學學報
하북의과대학학보
JOURNAL OF HEBEI MEDICAL UNIVERSITY
2003年
3期
129-132
,共4页
房文亮%王永祥%金玉怀%金士香%周雪燕
房文亮%王永祥%金玉懷%金士香%週雪燕
방문량%왕영상%금옥부%금사향%주설연
白细胞介素-15%质粒%柯萨奇病毒B组%小鼠
白細胞介素-15%質粒%柯薩奇病毒B組%小鼠
백세포개소-15%질립%가살기병독B조%소서
目的探讨人白细胞介素-15(human interleukin-15,hIL-15)基因佐剂对柯萨奇B3病毒(Coxsackievirus B3,CVB3)VP1基因疫苗的免疫增强效果.方法从人胚肺二倍体细胞提取hIL-15的mRNA,用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)扩增出cDNA,构建成真核表达克隆pcDNA3-IL-15.将pcDNA3-VP1、pcDNA3-VP1+pcDNA3-IL-15、pcDNA3-IL-15、pcDNA3和盐水分别肌内注射Balb/c小鼠,每次免疫后6天取血清用微量中和试验测CVB3中和抗体,3次免疫后用800TCID50 CVB3感染小鼠,观察小鼠的生存率.结果pcDNA3-IL-15重组质粒的目的基因与hIL-15基因序列相同;pcDNA3-VP1和pcDNA3-VP1+pcDNA3-IL-15能诱导小鼠产生中和抗体,抗体滴度随免疫次数增加而提高;pcDNA3-VP1+pcDNA3-IL-15组抗体滴度和生存率均高于pcDNA3-VP1组.结论本研究成功构建了hIL-15重组质粒,该质粒对真核表达重组质粒pcDNA3-VP1有一定的免疫原性增强作用.
目的探討人白細胞介素-15(human interleukin-15,hIL-15)基因佐劑對柯薩奇B3病毒(Coxsackievirus B3,CVB3)VP1基因疫苗的免疫增彊效果.方法從人胚肺二倍體細胞提取hIL-15的mRNA,用逆轉錄-聚閤酶鏈反應(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)擴增齣cDNA,構建成真覈錶達剋隆pcDNA3-IL-15.將pcDNA3-VP1、pcDNA3-VP1+pcDNA3-IL-15、pcDNA3-IL-15、pcDNA3和鹽水分彆肌內註射Balb/c小鼠,每次免疫後6天取血清用微量中和試驗測CVB3中和抗體,3次免疫後用800TCID50 CVB3感染小鼠,觀察小鼠的生存率.結果pcDNA3-IL-15重組質粒的目的基因與hIL-15基因序列相同;pcDNA3-VP1和pcDNA3-VP1+pcDNA3-IL-15能誘導小鼠產生中和抗體,抗體滴度隨免疫次數增加而提高;pcDNA3-VP1+pcDNA3-IL-15組抗體滴度和生存率均高于pcDNA3-VP1組.結論本研究成功構建瞭hIL-15重組質粒,該質粒對真覈錶達重組質粒pcDNA3-VP1有一定的免疫原性增彊作用.
목적탐토인백세포개소-15(human interleukin-15,hIL-15)기인좌제대가살기B3병독(Coxsackievirus B3,CVB3)VP1기인역묘적면역증강효과.방법종인배폐이배체세포제취hIL-15적mRNA,용역전록-취합매련반응(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)확증출cDNA,구건성진핵표체극륭pcDNA3-IL-15.장pcDNA3-VP1、pcDNA3-VP1+pcDNA3-IL-15、pcDNA3-IL-15、pcDNA3화염수분별기내주사Balb/c소서,매차면역후6천취혈청용미량중화시험측CVB3중화항체,3차면역후용800TCID50 CVB3감염소서,관찰소서적생존솔.결과pcDNA3-IL-15중조질립적목적기인여hIL-15기인서렬상동;pcDNA3-VP1화pcDNA3-VP1+pcDNA3-IL-15능유도소서산생중화항체,항체적도수면역차수증가이제고;pcDNA3-VP1+pcDNA3-IL-15조항체적도화생존솔균고우pcDNA3-VP1조.결론본연구성공구건료hIL-15중조질립,해질립대진핵표체중조질립pcDNA3-VP1유일정적면역원성증강작용.
