山西大学学报（自然科学版）
山西大學學報（自然科學版）
산서대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SHANXI UNIVERSITY
2000年
2期
149-152
,共4页
石亚伟%范俊虎%袁静明%徐明群
石亞偉%範俊虎%袁靜明%徐明群
석아위%범준호%원정명%서명군
MI蛋白前体%剪切%内蛋白子%突变体
MI蛋白前體%剪切%內蛋白子%突變體
MI단백전체%전절%내단백자%돌변체
将含麦芽糖结合蛋白-嗜热菌DNA聚合酶内蛋白子基因的pMI84、pMI94、pMI95三个重组突变体质粒转入E.coli2426,经发酵及IPTG低温诱导表达,直链淀粉糖亲和纯化获得MI84(ser1/Ser538Stop)、MI94(Ser1→CysH1/Ser538Stop)、MI95(Ser1→A1a1/Ser538Stop)三种蛋白质前体.研究了pH、温度、巯基试剂对内蛋白子N末端的剪切影响.除MI95外,MI84、MI94前体蛋白均能发生剪切反应,DTT能明显促进MI84、MI94剪切,而且MI94剪切效果优于MI84.不同还原剂对MI94诱导差异较小,温度升高能明显加快MI94剪切反应,随着pH升高也能促进MI94剪切反应.
將含麥芽糖結閤蛋白-嗜熱菌DNA聚閤酶內蛋白子基因的pMI84、pMI94、pMI95三箇重組突變體質粒轉入E.coli2426,經髮酵及IPTG低溫誘導錶達,直鏈澱粉糖親和純化穫得MI84(ser1/Ser538Stop)、MI94(Ser1→CysH1/Ser538Stop)、MI95(Ser1→A1a1/Ser538Stop)三種蛋白質前體.研究瞭pH、溫度、巰基試劑對內蛋白子N末耑的剪切影響.除MI95外,MI84、MI94前體蛋白均能髮生剪切反應,DTT能明顯促進MI84、MI94剪切,而且MI94剪切效果優于MI84.不同還原劑對MI94誘導差異較小,溫度升高能明顯加快MI94剪切反應,隨著pH升高也能促進MI94剪切反應.
장함맥아당결합단백-기열균DNA취합매내단백자기인적pMI84、pMI94、pMI95삼개중조돌변체질립전입E.coli2426,경발효급IPTG저온유도표체,직련정분당친화순화획득MI84(ser1/Ser538Stop)、MI94(Ser1→CysH1/Ser538Stop)、MI95(Ser1→A1a1/Ser538Stop)삼충단백질전체.연구료pH、온도、구기시제대내단백자N말단적전절영향.제MI95외,MI84、MI94전체단백균능발생전절반응,DTT능명현촉진MI84、MI94전절,이차MI94전절효과우우MI84.불동환원제대MI94유도차이교소,온도승고능명현가쾌MI94전절반응,수착pH승고야능촉진MI94전절반응.
