复旦学报（自然科学版）
複旦學報（自然科學版）
복단학보（자연과학판）
JOURNAL OF FUDAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2000年
3期
264-268,272
,共6页
周则迅%袁汉英%何炜%高卜渝%李育阳
週則迅%袁漢英%何煒%高蔔渝%李育暘
주칙신%원한영%하위%고복투%리육양
酵母%乙肝病毒表面抗原%组成型表达
酵母%乙肝病毒錶麵抗原%組成型錶達
효모%을간병독표면항원%조성형표체
以酵母载体YFD59为基础,将乙肝病毒表面抗原原SA-28融合基因正向插入组成型启动子PPGK1及终止子TPGK1间,得到表达载体YFD59-LSS1.并将该表达载体分别转化BJ2168,DBY746,JRY188,BJ3505 4株不同的酿酒酵母株.再将YFD59-LSS1质粒上的表达单元克隆至高稳定载体pHC11的BamHⅠ位点.构建成3个带有不同拷贝数和不同插入方向表达单元的表达载体:pHC11-LSS1-1、pHC11-LSS1-2和pHC11-Lss1-7.将它们分别转化Y16,Y19 2株酿酒酵母菌.对不同工程菌株进行表达水平的测定,我们选到了高效表达乙肝病毒融合抗原的菌株,并发现带有以YFD59为基础的表达载体的工程菌表达水平要比带有以pHC11为基础的表达载体的工程菌的高,这可能与相应的表达载体在酵母细胞中的稳定性高低有关.
以酵母載體YFD59為基礎,將乙肝病毒錶麵抗原原SA-28融閤基因正嚮插入組成型啟動子PPGK1及終止子TPGK1間,得到錶達載體YFD59-LSS1.併將該錶達載體分彆轉化BJ2168,DBY746,JRY188,BJ3505 4株不同的釀酒酵母株.再將YFD59-LSS1質粒上的錶達單元剋隆至高穩定載體pHC11的BamHⅠ位點.構建成3箇帶有不同拷貝數和不同插入方嚮錶達單元的錶達載體:pHC11-LSS1-1、pHC11-LSS1-2和pHC11-Lss1-7.將它們分彆轉化Y16,Y19 2株釀酒酵母菌.對不同工程菌株進行錶達水平的測定,我們選到瞭高效錶達乙肝病毒融閤抗原的菌株,併髮現帶有以YFD59為基礎的錶達載體的工程菌錶達水平要比帶有以pHC11為基礎的錶達載體的工程菌的高,這可能與相應的錶達載體在酵母細胞中的穩定性高低有關.
이효모재체YFD59위기출,장을간병독표면항원원SA-28융합기인정향삽입조성형계동자PPGK1급종지자TPGK1간,득도표체재체YFD59-LSS1.병장해표체재체분별전화BJ2168,DBY746,JRY188,BJ3505 4주불동적양주효모주.재장YFD59-LSS1질립상적표체단원극륭지고은정재체pHC11적BamHⅠ위점.구건성3개대유불동고패수화불동삽입방향표체단원적표체재체:pHC11-LSS1-1、pHC11-LSS1-2화pHC11-Lss1-7.장타문분별전화Y16,Y19 2주양주효모균.대불동공정균주진행표체수평적측정,아문선도료고효표체을간병독융합항원적균주,병발현대유이YFD59위기출적표체재체적공정균표체수평요비대유이pHC11위기출적표체재체적공정균적고,저가능여상응적표체재체재효모세포중적은정성고저유관.
