四川大学学报（自然科学版）
四川大學學報（自然科學版）
사천대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE EDITION）
1999年
5期
940-946
,共7页
Q781启动子探针型载体%黄孢平革菌%基因启动子%大肠杆菌
Q781啟動子探針型載體%黃孢平革菌%基因啟動子%大腸桿菌
Q781계동자탐침형재체%황포평혁균%기인계동자%대장간균
利用启动子探钍型载体pSUPV4直接在大肠杆菌细胞中克隆到多个来自白腐丝状真菌-黄孢平革菌(Phanerochaete chrysosporium)的基因启动子片段.这些基因启动子片段能在大肠杆菌细胞中启动重组卡那霉素抗性基因(rkanr)的表达,不同片段赋予宿主细胞以不同的卡那霉素抗性水平,最高的可达1000μg/mL,最低的则为50μg/mL.琼脂糖凝胶电泳显示这些重组质粒DNA中均有不同大小的插入片段,其范围是0.5～6.0kb.选取一个插入3.9kb的重组质粒pPC33所作的Southern杂交结果表明,插入片段以单拷贝形式存在于P.chrysosporium的基因组中.当此片段5′-端被除去1.8kb后,余下的2.1kb片段可使融合的Kanr基因的表达效率提高60%.
利用啟動子探釷型載體pSUPV4直接在大腸桿菌細胞中剋隆到多箇來自白腐絲狀真菌-黃孢平革菌(Phanerochaete chrysosporium)的基因啟動子片段.這些基因啟動子片段能在大腸桿菌細胞中啟動重組卡那黴素抗性基因(rkanr)的錶達,不同片段賦予宿主細胞以不同的卡那黴素抗性水平,最高的可達1000μg/mL,最低的則為50μg/mL.瓊脂糖凝膠電泳顯示這些重組質粒DNA中均有不同大小的插入片段,其範圍是0.5～6.0kb.選取一箇插入3.9kb的重組質粒pPC33所作的Southern雜交結果錶明,插入片段以單拷貝形式存在于P.chrysosporium的基因組中.噹此片段5′-耑被除去1.8kb後,餘下的2.1kb片段可使融閤的Kanr基因的錶達效率提高60%.
이용계동자탐토형재체pSUPV4직접재대장간균세포중극륭도다개래자백부사상진균-황포평혁균(Phanerochaete chrysosporium)적기인계동자편단.저사기인계동자편단능재대장간균세포중계동중조잡나매소항성기인(rkanr)적표체,불동편단부여숙주세포이불동적잡나매소항성수평,최고적가체1000μg/mL,최저적칙위50μg/mL.경지당응효전영현시저사중조질립DNA중균유불동대소적삽입편단,기범위시0.5～6.0kb.선취일개삽입3.9kb적중조질립pPC33소작적Southern잡교결과표명,삽입편단이단고패형식존재우P.chrysosporium적기인조중.당차편단5′-단피제거1.8kb후,여하적2.1kb편단가사융합적Kanr기인적표체효솔제고60%.
