生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2002年
6期
662-666
,共5页
马伟%茅翔%卢捷%姜卫红%焦瑞身%覃重军%赵国屏
馬偉%茅翔%盧捷%薑衛紅%焦瑞身%覃重軍%趙國屏
마위%모상%로첩%강위홍%초서신%담중군%조국병
头状链轮丝菌%复制起始区(oriC)%跨属复制起始活性
頭狀鏈輪絲菌%複製起始區(oriC)%跨屬複製起始活性
두상련륜사균%복제기시구(oriC)%과속복제기시활성
头状链轮丝菌(Streptoverticillum caespitosus) ATCC27422是抗肿瘤药物--丝裂霉素A的产生菌,根据高GC含量革兰氏阳性菌染色体复制起始区两端基因序列的保守性,采用PCR方法从该菌中克隆了一段包含染色体复制起始区(oriC)的1.3 kb片段.序列分析发现,克隆片段与天蓝色链霉菌的oriC及邻近区域的同源性达80%以上;头状链轮丝菌 oriC中含有22个DnaA-box,保守序列为TTGTCCACA.以克隆片段构建的质粒可以跨属转化变铅青链霉菌(S. lividans) ZX7,原生质体转化效率为3.2×102个/μgDNA;质粒在S. lividans ZX7中能以低拷贝形式稳定存在;转化子的菌落和菌丝形态均正常. 头状链轮丝菌oriC序列与几种链霉菌的oriC有较高的同源性,以及在变铅青链霉菌中仍具有复制起始活性等说明链轮丝菌属与链霉菌属在系统发生上关系较近;但采用最大似然法分析oriC序列构建的头状链轮丝菌与几种链霉菌的系统进化树表明,头状链轮丝菌与几种链霉菌之间的分化距离远大于链霉菌之间的分化距离.该证据支持链轮丝菌属的独立分属.
頭狀鏈輪絲菌(Streptoverticillum caespitosus) ATCC27422是抗腫瘤藥物--絲裂黴素A的產生菌,根據高GC含量革蘭氏暘性菌染色體複製起始區兩耑基因序列的保守性,採用PCR方法從該菌中剋隆瞭一段包含染色體複製起始區(oriC)的1.3 kb片段.序列分析髮現,剋隆片段與天藍色鏈黴菌的oriC及鄰近區域的同源性達80%以上;頭狀鏈輪絲菌 oriC中含有22箇DnaA-box,保守序列為TTGTCCACA.以剋隆片段構建的質粒可以跨屬轉化變鉛青鏈黴菌(S. lividans) ZX7,原生質體轉化效率為3.2×102箇/μgDNA;質粒在S. lividans ZX7中能以低拷貝形式穩定存在;轉化子的菌落和菌絲形態均正常. 頭狀鏈輪絲菌oriC序列與幾種鏈黴菌的oriC有較高的同源性,以及在變鉛青鏈黴菌中仍具有複製起始活性等說明鏈輪絲菌屬與鏈黴菌屬在繫統髮生上關繫較近;但採用最大似然法分析oriC序列構建的頭狀鏈輪絲菌與幾種鏈黴菌的繫統進化樹錶明,頭狀鏈輪絲菌與幾種鏈黴菌之間的分化距離遠大于鏈黴菌之間的分化距離.該證據支持鏈輪絲菌屬的獨立分屬.
두상련륜사균(Streptoverticillum caespitosus) ATCC27422시항종류약물--사렬매소A적산생균,근거고GC함량혁란씨양성균염색체복제기시구량단기인서렬적보수성,채용PCR방법종해균중극륭료일단포함염색체복제기시구(oriC)적1.3 kb편단.서렬분석발현,극륭편단여천람색련매균적oriC급린근구역적동원성체80%이상;두상련륜사균 oriC중함유22개DnaA-box,보수서렬위TTGTCCACA.이극륭편단구건적질립가이과속전화변연청련매균(S. lividans) ZX7,원생질체전화효솔위3.2×102개/μgDNA;질립재S. lividans ZX7중능이저고패형식은정존재;전화자적균락화균사형태균정상. 두상련륜사균oriC서렬여궤충련매균적oriC유교고적동원성,이급재변연청련매균중잉구유복제기시활성등설명련륜사균속여련매균속재계통발생상관계교근;단채용최대사연법분석oriC서렬구건적두상련륜사균여궤충련매균적계통진화수표명,두상련륜사균여궤충련매균지간적분화거리원대우련매균지간적분화거리.해증거지지련륜사균속적독립분속.
