疾病控制杂志
疾病控製雜誌
질병공제잡지
CHINESE JOURNAL OF DISEASE CONTROL & PREVENTION
2002年
4期
297-300
,共4页
翁康生%周名权%吕小枫%陆晔%刘国星
翁康生%週名權%呂小楓%陸曄%劉國星
옹강생%주명권%려소풍%륙엽%류국성
螺杆菌,幽门/遗传学%基因/遗传学%大肠杆菌/遗传学
螺桿菌,幽門/遺傳學%基因/遺傳學%大腸桿菌/遺傳學
라간균,유문/유전학%기인/유전학%대장간균/유전학
目的构建含幽门螺杆菌(Hp)ureA、ureB基因重组质粒,测定、分析其核酸序列及推定的氨基酸序列,在E.coli中高效表达两基因,为检测试剂和疫苗研究提供基础依据和抗原.方法 PCR法扩增Hp菌株HPSH4的ureA、ureB基因,分别与pGEX-2T载体连接并转化大肠杆菌JM105,测定克隆基因的核酸序列并与GenBank公布的国外5株Hp菌株(26695,HPK5,J99,CPM630,M60398)的ureA、ureB基因作序列比较,以IPTG诱导,ureA、ureB基因在E.coli中高效表达.结果 ureA核酸同源性96.3%～98.1%,氨基酸同源性98.3%～100%;ureB核酸同源性95.8%～ 98.0%,氨基酸同源性96.4%～99.6%.以IPTG诱导,在E.coli中表达rureA融合蛋白55 600 D,rureB融合蛋白85 500 D.结论不同地区Hp菌株的ureA、ureB存在程度不同的变异,克隆并表达HPSH4的ureA、ureB与GenBank已公布的多数Hp菌株有极高同源性,在E.coli以融合蛋白高效表达rureA和rureB.
目的構建含幽門螺桿菌(Hp)ureA、ureB基因重組質粒,測定、分析其覈痠序列及推定的氨基痠序列,在E.coli中高效錶達兩基因,為檢測試劑和疫苗研究提供基礎依據和抗原.方法 PCR法擴增Hp菌株HPSH4的ureA、ureB基因,分彆與pGEX-2T載體連接併轉化大腸桿菌JM105,測定剋隆基因的覈痠序列併與GenBank公佈的國外5株Hp菌株(26695,HPK5,J99,CPM630,M60398)的ureA、ureB基因作序列比較,以IPTG誘導,ureA、ureB基因在E.coli中高效錶達.結果 ureA覈痠同源性96.3%～98.1%,氨基痠同源性98.3%～100%;ureB覈痠同源性95.8%～ 98.0%,氨基痠同源性96.4%～99.6%.以IPTG誘導,在E.coli中錶達rureA融閤蛋白55 600 D,rureB融閤蛋白85 500 D.結論不同地區Hp菌株的ureA、ureB存在程度不同的變異,剋隆併錶達HPSH4的ureA、ureB與GenBank已公佈的多數Hp菌株有極高同源性,在E.coli以融閤蛋白高效錶達rureA和rureB.
목적구건함유문라간균(Hp)ureA、ureB기인중조질립,측정、분석기핵산서렬급추정적안기산서렬,재E.coli중고효표체량기인,위검측시제화역묘연구제공기출의거화항원.방법 PCR법확증Hp균주HPSH4적ureA、ureB기인,분별여pGEX-2T재체련접병전화대장간균JM105,측정극륭기인적핵산서렬병여GenBank공포적국외5주Hp균주(26695,HPK5,J99,CPM630,M60398)적ureA、ureB기인작서렬비교,이IPTG유도,ureA、ureB기인재E.coli중고효표체.결과 ureA핵산동원성96.3%～98.1%,안기산동원성98.3%～100%;ureB핵산동원성95.8%～ 98.0%,안기산동원성96.4%～99.6%.이IPTG유도,재E.coli중표체rureA융합단백55 600 D,rureB융합단백85 500 D.결론불동지구Hp균주적ureA、ureB존재정도불동적변이,극륭병표체HPSH4적ureA、ureB여GenBank이공포적다수Hp균주유겁고동원성,재E.coli이융합단백고효표체rureA화rureB.
