中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2002年
3期
308-312
,共5页
人促甲状腺素受体%基因重组%蛋白表达
人促甲狀腺素受體%基因重組%蛋白錶達
인촉갑상선소수체%기인중조%단백표체
为研究重组人促甲状腺素受体(hTSHR)膜外区表达产物及其生物活性与免疫活性,将hT-SHR膜外区编码基因(编码第3～420位氨基酸)重组到表达型质粒pGEX-4T-3上,测序结果表明序列正确,未改变读码框架.然后转入E.coli Ad494进行诱导表达.纯化后的表达产物经SDS-PAGE、Western印迹及放射受体法分别检测其分子量、免疫活性和生物活性.重组TSHR3～420膜外区蛋白(简称TSHR3-420)产率为159～202μg/L培养基,分子量为48.9 kD;融合蛋白(简称GST-TSHR3～420)分子量为75.4 kD.两种表达产物都可与TSHR Ab反应;TSHR3～420可与125I-TSH结合.
為研究重組人促甲狀腺素受體(hTSHR)膜外區錶達產物及其生物活性與免疫活性,將hT-SHR膜外區編碼基因(編碼第3～420位氨基痠)重組到錶達型質粒pGEX-4T-3上,測序結果錶明序列正確,未改變讀碼框架.然後轉入E.coli Ad494進行誘導錶達.純化後的錶達產物經SDS-PAGE、Western印跡及放射受體法分彆檢測其分子量、免疫活性和生物活性.重組TSHR3～420膜外區蛋白(簡稱TSHR3-420)產率為159～202μg/L培養基,分子量為48.9 kD;融閤蛋白(簡稱GST-TSHR3～420)分子量為75.4 kD.兩種錶達產物都可與TSHR Ab反應;TSHR3～420可與125I-TSH結閤.
위연구중조인촉갑상선소수체(hTSHR)막외구표체산물급기생물활성여면역활성,장hT-SHR막외구편마기인(편마제3～420위안기산)중조도표체형질립pGEX-4T-3상,측서결과표명서렬정학,미개변독마광가.연후전입E.coli Ad494진행유도표체.순화후적표체산물경SDS-PAGE、Western인적급방사수체법분별검측기분자량、면역활성화생물활성.중조TSHR3～420막외구단백(간칭TSHR3-420)산솔위159～202μg/L배양기,분자량위48.9 kD;융합단백(간칭GST-TSHR3～420)분자량위75.4 kD.량충표체산물도가여TSHR Ab반응;TSHR3～420가여125I-TSH결합.
