中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2001年
3期
288-292
,共5页
陆纲%宫明%陈瑞华%贾弘禔
陸綱%宮明%陳瑞華%賈弘禔
륙강%궁명%진서화%가홍제
蛋白激酶C%生肌素浆核转位%nAChR基因表达
蛋白激酶C%生肌素漿覈轉位%nAChR基因錶達
단백격매C%생기소장핵전위%nAChR기인표체
烟碱样乙酰胆碱受体(nAChR)的表达调控受神经电活动影响，电刺激引起肌细胞膜去极化可抑制nAChR的表达.以往的研究表明，Ca2+和PKC以及生肌素在其中发挥着重要的作用.然而，目前尚不清楚究竟是哪种PKC亚型参与此过程，PKC激活对特异转录因子生肌素浆核转位有何影响?为探讨PKC在去极化-nAChR转录偶联中的作用，构建了含nAChRγ亚基启动子的绿色荧光蛋白(GFP)表达载体pEGFP-γ，将其分别与4种cPKC(PKCα、PKCβⅠ、PKCβⅡ、PKCγ)真核表达载体共转染C2C12肌细胞.结果发现PKCβⅠ、PKCβⅡ对nAChRγ启动子驱动的GFP报告基因表达没有影响(P＞0.05)，PKCγ对报告基因表达有抑制作用(P＜0.05)，PKCα则有明显抑制作用(P＜0.01).采用4种cPKC真核表达载体与GFP-生肌素融合蛋白表达载体(pGFP-myog)共转染C2C12肌细胞，观察了不同亚型PKC表达对生肌素浆至核转位的影响，发现只有强制性表达外源性PKCα可明显抑制生肌素向核中转位，而PKCβⅠ、PKCβⅡ及PKCγ对生肌素浆核转位没有明显抑制作用.结果提示，PKCα通过抑制生肌素转位是阻遏nAChR基因表达机制之一.
煙堿樣乙酰膽堿受體(nAChR)的錶達調控受神經電活動影響，電刺激引起肌細胞膜去極化可抑製nAChR的錶達.以往的研究錶明，Ca2+和PKC以及生肌素在其中髮揮著重要的作用.然而，目前尚不清楚究竟是哪種PKC亞型參與此過程，PKC激活對特異轉錄因子生肌素漿覈轉位有何影響?為探討PKC在去極化-nAChR轉錄偶聯中的作用，構建瞭含nAChRγ亞基啟動子的綠色熒光蛋白(GFP)錶達載體pEGFP-γ，將其分彆與4種cPKC(PKCα、PKCβⅠ、PKCβⅡ、PKCγ)真覈錶達載體共轉染C2C12肌細胞.結果髮現PKCβⅠ、PKCβⅡ對nAChRγ啟動子驅動的GFP報告基因錶達沒有影響(P＞0.05)，PKCγ對報告基因錶達有抑製作用(P＜0.05)，PKCα則有明顯抑製作用(P＜0.01).採用4種cPKC真覈錶達載體與GFP-生肌素融閤蛋白錶達載體(pGFP-myog)共轉染C2C12肌細胞，觀察瞭不同亞型PKC錶達對生肌素漿至覈轉位的影響，髮現隻有彊製性錶達外源性PKCα可明顯抑製生肌素嚮覈中轉位，而PKCβⅠ、PKCβⅡ及PKCγ對生肌素漿覈轉位沒有明顯抑製作用.結果提示，PKCα通過抑製生肌素轉位是阻遏nAChR基因錶達機製之一.
연감양을선담감수체(nAChR)적표체조공수신경전활동영향，전자격인기기세포막거겁화가억제nAChR적표체.이왕적연구표명，Ca2+화PKC이급생기소재기중발휘착중요적작용.연이，목전상불청초구경시나충PKC아형삼여차과정，PKC격활대특이전록인자생기소장핵전위유하영향?위탐토PKC재거겁화-nAChR전록우련중적작용，구건료함nAChRγ아기계동자적록색형광단백(GFP)표체재체pEGFP-γ，장기분별여4충cPKC(PKCα、PKCβⅠ、PKCβⅡ、PKCγ)진핵표체재체공전염C2C12기세포.결과발현PKCβⅠ、PKCβⅡ대nAChRγ계동자구동적GFP보고기인표체몰유영향(P＞0.05)，PKCγ대보고기인표체유억제작용(P＜0.05)，PKCα칙유명현억제작용(P＜0.01).채용4충cPKC진핵표체재체여GFP-생기소융합단백표체재체(pGFP-myog)공전염C2C12기세포，관찰료불동아형PKC표체대생기소장지핵전위적영향，발현지유강제성표체외원성PKCα가명현억제생기소향핵중전위，이PKCβⅠ、PKCβⅡ급PKCγ대생기소장핵전위몰유명현억제작용.결과제시，PKCα통과억제생기소전위시조알nAChR기인표체궤제지일.
