江苏大学学报（医学版）
江囌大學學報（醫學版）
강소대학학보（의학판）
JOURNAL OF JIANGSU UNIVERSITY (MEDICINE EDITION)
2005年
4期
291-293
,共3页
周丽萍%姜旭淦%徐顺高%郑铁生%王卉放
週麗萍%薑旭淦%徐順高%鄭鐵生%王卉放
주려평%강욱감%서순고%정철생%왕훼방
葡萄糖脱氢酶%表达%基因
葡萄糖脫氫酶%錶達%基因
포도당탈경매%표체%기인
目的:将重组的葡萄糖脱氢酶基因在大肠杆菌中表达,优化表达条件,以期获得较高活力的葡萄糖脱氢酶.方法:将枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因与表达载体pET22b连接后转化至大肠杆菌JM109(DE3)进行表达,经对发酵时间、诱导物浓度、诱导时间以及细胞破碎等条件的控制,实现葡萄糖脱氢酶的高表达.结果:重组质粒转化菌发酵2 h后进入对数生长期,诱导剂IPTG浓度为0.5 mmol/L,诱导2.5～3 h后用240 W超声破碎细胞,表达的粗提酶活力比诱导前提高了近千倍.SDS-PAGE电泳显示重组菌能表达单体分子量为31.5KD的特异性蛋白.结论:表达质粒的拷贝数、宿主菌培养条件、细胞破碎方式等均能影响酶的表达量.
目的:將重組的葡萄糖脫氫酶基因在大腸桿菌中錶達,優化錶達條件,以期穫得較高活力的葡萄糖脫氫酶.方法:將枯草芽孢桿菌葡萄糖脫氫酶基因與錶達載體pET22b連接後轉化至大腸桿菌JM109(DE3)進行錶達,經對髮酵時間、誘導物濃度、誘導時間以及細胞破碎等條件的控製,實現葡萄糖脫氫酶的高錶達.結果:重組質粒轉化菌髮酵2 h後進入對數生長期,誘導劑IPTG濃度為0.5 mmol/L,誘導2.5～3 h後用240 W超聲破碎細胞,錶達的粗提酶活力比誘導前提高瞭近韆倍.SDS-PAGE電泳顯示重組菌能錶達單體分子量為31.5KD的特異性蛋白.結論:錶達質粒的拷貝數、宿主菌培養條件、細胞破碎方式等均能影響酶的錶達量.
목적:장중조적포도당탈경매기인재대장간균중표체,우화표체조건,이기획득교고활력적포도당탈경매.방법:장고초아포간균포도당탈경매기인여표체재체pET22b련접후전화지대장간균JM109(DE3)진행표체,경대발효시간、유도물농도、유도시간이급세포파쇄등조건적공제,실현포도당탈경매적고표체.결과:중조질립전화균발효2 h후진입대수생장기,유도제IPTG농도위0.5 mmol/L,유도2.5～3 h후용240 W초성파쇄세포,표체적조제매활력비유도전제고료근천배.SDS-PAGE전영현시중조균능표체단체분자량위31.5KD적특이성단백.결론:표체질립적고패수、숙주균배양조건、세포파쇄방식등균능영향매적표체량.
