生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2006年
4期
629-634
,共6页
王彩霞%王国平%洪霓%姜波%刘辉%吴康为
王綵霞%王國平%洪霓%薑波%劉輝%吳康為
왕채하%왕국평%홍예%강파%류휘%오강위
柑橘衰退病毒%多克隆抗体%单克隆抗体%三抗体夹心ELISA
柑橘衰退病毒%多剋隆抗體%單剋隆抗體%三抗體夾心ELISA
감귤쇠퇴병독%다극륭항체%단극륭항체%삼항체협심ELISA
通过改进提纯方法获得了柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)的提纯液,其产量为1mg/100g植物组织.用CTV免疫大耳白兔,获得多克隆抗体,间接ELISA效价为1:25 600.用CTV免疫小鼠,经细胞融合、ELISA筛选和克隆化培养,获得18株能稳定分泌抗CTV单克隆抗体的杂交瘤单细胞株.对其中4株单克隆腹水抗体进行分析的结果表明,这些抗体的ELISA效价为1:51 200～1:204 800,其中2G和3H的抗体类型及亚类为IgG2a,1E和4H为IgG2b.用所制备抗体对不同来源柑橘样品的CTV检测结果显示,单克隆和多克隆抗体结合使用,采用三抗体夹心ELISA(TAS-ELISA)可以获得理想的检测效果,其特异性强、灵敏度高.同时发现所分析4株单克隆抗体对不同的CTV分离物鉴别能力存在差异,但有关这些CTV分离物的特性及其血清学关系还需进一步研究.
通過改進提純方法穫得瞭柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)的提純液,其產量為1mg/100g植物組織.用CTV免疫大耳白兔,穫得多剋隆抗體,間接ELISA效價為1:25 600.用CTV免疫小鼠,經細胞融閤、ELISA篩選和剋隆化培養,穫得18株能穩定分泌抗CTV單剋隆抗體的雜交瘤單細胞株.對其中4株單剋隆腹水抗體進行分析的結果錶明,這些抗體的ELISA效價為1:51 200～1:204 800,其中2G和3H的抗體類型及亞類為IgG2a,1E和4H為IgG2b.用所製備抗體對不同來源柑橘樣品的CTV檢測結果顯示,單剋隆和多剋隆抗體結閤使用,採用三抗體夾心ELISA(TAS-ELISA)可以穫得理想的檢測效果,其特異性彊、靈敏度高.同時髮現所分析4株單剋隆抗體對不同的CTV分離物鑒彆能力存在差異,但有關這些CTV分離物的特性及其血清學關繫還需進一步研究.
통과개진제순방법획득료감귤쇠퇴병독(Citrus tristeza virus,CTV)적제순액,기산량위1mg/100g식물조직.용CTV면역대이백토,획득다극륭항체,간접ELISA효개위1:25 600.용CTV면역소서,경세포융합、ELISA사선화극륭화배양,획득18주능은정분비항CTV단극륭항체적잡교류단세포주.대기중4주단극륭복수항체진행분석적결과표명,저사항체적ELISA효개위1:51 200～1:204 800,기중2G화3H적항체류형급아류위IgG2a,1E화4H위IgG2b.용소제비항체대불동래원감귤양품적CTV검측결과현시,단극륭화다극륭항체결합사용,채용삼항체협심ELISA(TAS-ELISA)가이획득이상적검측효과,기특이성강、령민도고.동시발현소분석4주단극륭항체대불동적CTV분리물감별능력존재차이,단유관저사CTV분리물적특성급기혈청학관계환수진일보연구.
