新疆大学学报(自然科学版)
新疆大學學報(自然科學版)
신강대학학보(자연과학판)
XINJIANG UNIVERSITY JOURNAL(NATURAL SCIENCE EDITION)
2006年
4期
384-388
,共5页
吾甫尔·米吉提%艾山江·阿布都拉%徐琴%艾尔肯·热合曼%A.S.Chunaev
吾甫爾·米吉提%艾山江·阿佈都拉%徐琴%艾爾肯·熱閤曼%A.S.Chunaev
오보이·미길제%애산강·아포도랍%서금%애이긍·열합만%A.S.Chunaev
莱茵衣藻%叶绿素b%生物合成%cbn1基因%cao基因%分子定位
萊茵衣藻%葉綠素b%生物閤成%cbn1基因%cao基因%分子定位
래인의조%협록소b%생물합성%cbn1기인%cao기인%분자정위
用电击法将带有CAO基因片段的Psp109-E8质粒转入到莱茵衣藻cbn1-48mt+基因突变株中后,转化子中出现了叶绿素b的恢复性表达,初步验证了丧失合成叶绿素b能力的cbn1和cao突变基因具有等位性的属性;将1641-1b(cbn1-43 mt+)和CC-1354(cbn1-48 mt+)突变株分别与CBS5(cao5 mt-)突变株的分离子CBS5-c1和CBS5-c5进行杂交,并通过随机分析方法分离获得1842个减数分裂后代分离子,经检测其中均没有发现有野生性表型的分离子,初步证明cbn1和cao4突变基因间有着非常紧密的连锁性;从上述杂交系分离获得的50多个四分子中也没有检测发现显示野生性表型的分离子,进一步证明了cbn1和cao突变基因具有等位性的属性;根据CAO基因的DNA序列,从5'-端和3'-端设计两个探针,分别与莱茵衣藻核基因组Ⅰ号染色体上GBP1 和 RB47分子标记之间的21个BAC克隆进行的点杂交实验结果显示,该两个探针序列与21号BAC克隆(莱茵衣藻BAC文库序列号33e2)片段均有同源区的特性,此项DNA杂交实验初步证明,CAO基因的位点是在cbn1突变基因左右两侧的GBP1和RB47两个分子标记之间的33e2 BAC克隆片段区.
用電擊法將帶有CAO基因片段的Psp109-E8質粒轉入到萊茵衣藻cbn1-48mt+基因突變株中後,轉化子中齣現瞭葉綠素b的恢複性錶達,初步驗證瞭喪失閤成葉綠素b能力的cbn1和cao突變基因具有等位性的屬性;將1641-1b(cbn1-43 mt+)和CC-1354(cbn1-48 mt+)突變株分彆與CBS5(cao5 mt-)突變株的分離子CBS5-c1和CBS5-c5進行雜交,併通過隨機分析方法分離穫得1842箇減數分裂後代分離子,經檢測其中均沒有髮現有野生性錶型的分離子,初步證明cbn1和cao4突變基因間有著非常緊密的連鎖性;從上述雜交繫分離穫得的50多箇四分子中也沒有檢測髮現顯示野生性錶型的分離子,進一步證明瞭cbn1和cao突變基因具有等位性的屬性;根據CAO基因的DNA序列,從5'-耑和3'-耑設計兩箇探針,分彆與萊茵衣藻覈基因組Ⅰ號染色體上GBP1 和 RB47分子標記之間的21箇BAC剋隆進行的點雜交實驗結果顯示,該兩箇探針序列與21號BAC剋隆(萊茵衣藻BAC文庫序列號33e2)片段均有同源區的特性,此項DNA雜交實驗初步證明,CAO基因的位點是在cbn1突變基因左右兩側的GBP1和RB47兩箇分子標記之間的33e2 BAC剋隆片段區.
용전격법장대유CAO기인편단적Psp109-E8질립전입도래인의조cbn1-48mt+기인돌변주중후,전화자중출현료협록소b적회복성표체,초보험증료상실합성협록소b능력적cbn1화cao돌변기인구유등위성적속성;장1641-1b(cbn1-43 mt+)화CC-1354(cbn1-48 mt+)돌변주분별여CBS5(cao5 mt-)돌변주적분리자CBS5-c1화CBS5-c5진행잡교,병통과수궤분석방법분리획득1842개감수분렬후대분리자,경검측기중균몰유발현유야생성표형적분리자,초보증명cbn1화cao4돌변기인간유착비상긴밀적련쇄성;종상술잡교계분리획득적50다개사분자중야몰유검측발현현시야생성표형적분리자,진일보증명료cbn1화cao돌변기인구유등위성적속성;근거CAO기인적DNA서렬,종5'-단화3'-단설계량개탐침,분별여래인의조핵기인조Ⅰ호염색체상GBP1 화 RB47분자표기지간적21개BAC극륭진행적점잡교실험결과현시,해량개탐침서렬여21호BAC극륭(래인의조BAC문고서렬호33e2)편단균유동원구적특성,차항DNA잡교실험초보증명,CAO기인적위점시재cbn1돌변기인좌우량측적GBP1화RB47량개분자표기지간적33e2 BAC극륭편단구.