草业科学
草業科學
초업과학
PRATACULTURAL SCIENCE
2007年
10期
52-56
,共5页
周玉雷%徐粤宇%赵茂林%曹致中%王志平
週玉雷%徐粵宇%趙茂林%曹緻中%王誌平
주옥뢰%서월우%조무림%조치중%왕지평
多枝赖草%高分子量核DNA%脉冲场电泳
多枝賴草%高分子量覈DNA%脈遲場電泳
다지뢰초%고분자량핵DNA%맥충장전영
以多枝赖草Leymus multicaulis黄化苗幼嫩叶片为材料,在液氮中研磨成粉末,加入冰冷的细胞核抽提缓冲液,经一系列钢制细胞筛过滤,离心分离细胞核,相差显微镜镜检后,用低熔点琼脂糖包埋,蛋白酶K原位裂解,经脉冲场电泳分离,用1%低熔点琼脂糖回收获得了较纯净的分子量大于2 Mb的核DNA,Southern杂交显示没有叶绿体和线粒体DNA的污染.利用该方法制备的高分子量核DNA,可用于后续可转化人工染色体(TAC)文库的构建和基因组分析.
以多枝賴草Leymus multicaulis黃化苗幼嫩葉片為材料,在液氮中研磨成粉末,加入冰冷的細胞覈抽提緩遲液,經一繫列鋼製細胞篩過濾,離心分離細胞覈,相差顯微鏡鏡檢後,用低鎔點瓊脂糖包埋,蛋白酶K原位裂解,經脈遲場電泳分離,用1%低鎔點瓊脂糖迴收穫得瞭較純淨的分子量大于2 Mb的覈DNA,Southern雜交顯示沒有葉綠體和線粒體DNA的汙染.利用該方法製備的高分子量覈DNA,可用于後續可轉化人工染色體(TAC)文庫的構建和基因組分析.
이다지뢰초Leymus multicaulis황화묘유눈협편위재료,재액담중연마성분말,가입빙랭적세포핵추제완충액,경일계렬강제세포사과려,리심분리세포핵,상차현미경경검후,용저용점경지당포매,단백매K원위렬해,경맥충장전영분리,용1%저용점경지당회수획득료교순정적분자량대우2 Mb적핵DNA,Southern잡교현시몰유협록체화선립체DNA적오염.이용해방법제비적고분자량핵DNA,가용우후속가전화인공염색체(TAC)문고적구건화기인조분석.
