丙型肝炎病毒HLA-A2限制性复合多表位基因重组腺病毒的包装、筛选及鉴定
병형간염병독HLA-A2한제성복합다표위기인중조선병독적포장、사선급감정
Packaging, selection and identification of recombinant adenoviruses carrying HCV HLA-A2 restricted compound multi-epitopes antigen
  • 万方数据
    临床肝胆病杂志 림상간담병잡지
    CHINESE JOURNAL OF CLINICAL HEPATOLOGY
    2011年 1期 53-56 ,共4页

    韦三华%任继鸿%刘丽%贾战生%董轲%林芳%王希%张利军%刘昕阳%张惠中

    위삼화%임계홍%류려%가전생%동가%림방%왕희%장리군%류흔양%장혜중

    肝炎病毒属%表位%腺病毒,人 肝炎病毒屬%錶位%腺病毒,人
    간염병독속%표위%선병독,인
    目的 构建丙型肝炎病毒(HCV)HLA-A2限制性复合多表位基因的重组转移质粒pAdtrack-CMV-Ub-Mep,转染HEK293细胞,包装重组腺病毒rAd-Ub-Mep.方法 复合表位Ub-Mep基因克隆到pAdTrack-CMV穿梭质粒,得到重组的穿梭质粒pAdtrack-CMV-Ub-Mep,将穿梭质粒pAdtrack-CMV-Ub-Mep和腺病毒骨架质粒pAdEasy1共转染HEK293细胞,产生重组腺病毒rAd-ub-Mep,通过检测绿色荧光蛋白(GFP)的表达和PCR扩增目的 基因的方法鉴定重组腺病毒,并测定重组腺病毒滴度.结果 经酶切鉴定、PCR鉴定和荧光分析,均证实得到重组的腺病毒.测定病毒滴度为1.2x 1011cfu/L.结论 成功包装出重组腺病毒rAd-Ub-MEP,构建了HCV HLA-A2限制性多表位基因的重组腺病毒疫苗,为进一步研究HLA-A2限制性复合多表位基因诱导的细胞免疫应答奠定了基础.
    목적 구건병형간염병독(HCV)HLA-A2한제성복합다표위기인적중조전이질립pAdtrack-CMV-Ub-Mep,전염HEK293세포,포장중조선병독rAd-Ub-Mep.방법 복합표위Ub-Mep기인극륭도pAdTrack-CMV천사질립,득도중조적천사질립pAdtrack-CMV-Ub-Mep,장천사질립pAdtrack-CMV-Ub-Mep화선병독골가질립pAdEasy1공전염HEK293세포,산생중조선병독rAd-ub-Mep,통과검측록색형광단백(GFP)적표체화PCR확증목적 기인적방법감정중조선병독,병측정중조선병독적도.결과 경매절감정、PCR감정화형광분석,균증실득도중조적선병독.측정병독적도위1.2x 1011cfu/L.결론 성공포장출중조선병독rAd-Ub-MEP,구건료HCV HLA-A2한제성다표위기인적중조선병독역묘,위진일보연구HLA-A2한제성복합다표위기인유도적세포면역응답전정료기출.
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