实用医学杂志
實用醫學雜誌
실용의학잡지
THE JOURNAL OF PRACTICAL MEDICINE
2011年
1期
7-10
,共4页
丁姗姗%吴静%孙国栋%侯光辉%陈剑%徐锦堂
丁姍姍%吳靜%孫國棟%侯光輝%陳劍%徐錦堂
정산산%오정%손국동%후광휘%진검%서금당
间质干细胞%角膜内皮细胞%共培养%细胞增殖
間質榦細胞%角膜內皮細胞%共培養%細胞增殖
간질간세포%각막내피세포%공배양%세포증식
目的:探讨并优化人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)体外获取及培养增殖的方法并鉴定;观察兔角膜内皮细胞(cornea endothelial cells,CEC)与hUCMSCs共培养后增殖能力及细胞周期的变化.方法:用酶消化法体外分离培养hUCMSCs,流式细胞仪检测hUCMSCs免疫表型:将CEC分别与hUCMSCs、兔角膜基质细胞在Transwell体系中共培养,通过流式细胞术观察内皮细胞增殖能力及细胞周期的变化.结果:采用酶消化法能有效分离纯化hUCMSCs.接种24 h,贴壁细胞形态多为长梭形、多边形或成纤维细胞样形态,大小均一.流式细胞仪分析第3代细胞均表达CD29、CD44、CD105,不表达造血干细胞标记CD34、CD45和HLA-DR.与空白对照组CEC周期比较脐带间充质干细胞组与基质细胞组角膜内皮细胞S期细胞比例增加.G1期细胞比例下降,干细胞组增加幅度高于基质细胞组.干细胞组角膜内皮细胞S期细胞比例比空白对照组的平均增加近17%,增殖能力显著提高.结论:经鉴定用酶消化法体外能成功分离培养出hUCMSCs,将其与CEC共培养能促进CEC增殖.
目的:探討併優化人臍帶間充質榦細胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)體外穫取及培養增殖的方法併鑒定;觀察兔角膜內皮細胞(cornea endothelial cells,CEC)與hUCMSCs共培養後增殖能力及細胞週期的變化.方法:用酶消化法體外分離培養hUCMSCs,流式細胞儀檢測hUCMSCs免疫錶型:將CEC分彆與hUCMSCs、兔角膜基質細胞在Transwell體繫中共培養,通過流式細胞術觀察內皮細胞增殖能力及細胞週期的變化.結果:採用酶消化法能有效分離純化hUCMSCs.接種24 h,貼壁細胞形態多為長梭形、多邊形或成纖維細胞樣形態,大小均一.流式細胞儀分析第3代細胞均錶達CD29、CD44、CD105,不錶達造血榦細胞標記CD34、CD45和HLA-DR.與空白對照組CEC週期比較臍帶間充質榦細胞組與基質細胞組角膜內皮細胞S期細胞比例增加.G1期細胞比例下降,榦細胞組增加幅度高于基質細胞組.榦細胞組角膜內皮細胞S期細胞比例比空白對照組的平均增加近17%,增殖能力顯著提高.結論:經鑒定用酶消化法體外能成功分離培養齣hUCMSCs,將其與CEC共培養能促進CEC增殖.
목적:탐토병우화인제대간충질간세포(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)체외획취급배양증식적방법병감정;관찰토각막내피세포(cornea endothelial cells,CEC)여hUCMSCs공배양후증식능력급세포주기적변화.방법:용매소화법체외분리배양hUCMSCs,류식세포의검측hUCMSCs면역표형:장CEC분별여hUCMSCs、토각막기질세포재Transwell체계중공배양,통과류식세포술관찰내피세포증식능력급세포주기적변화.결과:채용매소화법능유효분리순화hUCMSCs.접충24 h,첩벽세포형태다위장사형、다변형혹성섬유세포양형태,대소균일.류식세포의분석제3대세포균표체CD29、CD44、CD105,불표체조혈간세포표기CD34、CD45화HLA-DR.여공백대조조CEC주기비교제대간충질간세포조여기질세포조각막내피세포S기세포비례증가.G1기세포비례하강,간세포조증가폭도고우기질세포조.간세포조각막내피세포S기세포비례비공백대조조적평균증가근17%,증식능력현저제고.결론:경감정용매소화법체외능성공분리배양출hUCMSCs,장기여CEC공배양능촉진CEC증식.
